本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，预先将大鼠GM-CSF特异性捕获抗体包被于酶标板微孔，待测样本中的GM-CSF抗原可与固相抗体特异性结合，洗涤去除游离杂质后，加入HRP标记检测抗体形成夹心复合物，底物显色终止后测定吸光度，吸光度数值与样本GM-CSF含量正相关，通过标准曲线完成定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)ELISA试剂盒
英文名称：GM-CSF ELISA Kit
货号：Y-E1659
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度小于0.9 pg/mL
检测范围：2.5 pg/mL - 100 pg/mL
反应时间：全程110分钟（样本孵育50min、酶标孵育30min、显色30min）
保存条件：2-8℃密封避光干燥保存，禁止冷冻
有效期：12个月
显色系统：HRP-TMB稳定显色体系，读数误差小、重复性高
检测波长：450nm
标准曲线绘制：七点梯度拟合，R²≥0.992
特异性：专一结合大鼠GM-CSF，与各类集落刺激因子无交叉识别
重复性：板内CV＜7%，板间CV＜9%
注意事项：样本采集后尽快检测，细胞因子易降解；洗板均匀彻底，避免孔间交叉污染；终止后及时上机读数。
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒室温平衡 32min，按说明书配比稀释洗涤液。
分组标记微孔，空白孔添加稀释缓冲液，标准品、阴阳性对照、待测稀释样本与酶结合物同步加孔。
封板后 37℃孵育 65min。
洗板 5 次，浸泡 31s 每次，吸干板内多余液体。
显色 AB 液避光显色 16min。
终止液加入混匀终止酶促反应。
450nm 酶标仪测值，测算 GM-CSF 含量。
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