大鼠肌球蛋白(MYS)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板固相化大鼠MYS特异性抗体，样本中的肌球蛋白抗原与固相抗体特异性结合，经酶促显色反应后检测吸光度，吸光度与样本MYS浓度正相关，可精准定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测浓度≤0.12ng/mL

检测范围：0.25ng/mL～18ng/mL

反应时间：总时长100min，孵育70min，显色15min，读数5min

保存条件：2～8℃密封避光保存，避免剧烈震荡

有效期：原装6个月，开封后20天内使用

显色系统：稳定型HRP-TMB显色体系

检测波长：450nm，630nm校准

标准曲线绘制：四参数曲线拟合，R²≥0.990

特异性：特异性结合大鼠肌球蛋白，与其他肌肉结构蛋白交叉反应率＜5%

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10%

注意事项：肌肉组织匀浆需彻底，离心去除残渣；避免蛋白变性；孵育温度恒定，减少实验误差。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒室温回温 35min，稀释 MYS 标准品建立系列梯度浓度，划分酶标板各类检测孔位。

直接向对应孔加入标准品、大鼠骨骼肌裂解上清样本 100μL，空白孔添加稀释缓冲液。

封板密闭，37℃恒温孵育 84min，特异性结合肌球蛋白大分子抗原。

倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 42s，连续洗板 6 次，彻底清除未结合蛋白。

除去空白孔，加入 HRP 标记检测抗体 100μL，避光 37℃孵育 37min。

分加显色 A、B 液各 50μL，轻微震荡混匀，避光显色 19min。

滴加终止液终止显色反应，酶标仪 450nm 读取吸光度，计算 MYS 表达量。