本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，固相载体包被大鼠PL-A2特异性捕获抗体，样本及标准品中的PL-A2抗原可与抗体特异性结合，洗去游离杂质后，加入酶标二抗形成夹心复合物，酶催化底物生成有色产物，吸光度值与样本中PL-A2含量呈正相关，通过标准曲线即可计算出大鼠样本中PL-A2的含量。
基本参数：
产品名称：大鼠磷脂酶A2(PL-A2)ELISA试剂盒
英文名称：PL-A2 ELISA Kit
货号：Y-E1361
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度≤0.1ng/mL
检测范围：0.3ng/mL - 9ng/mL
反应时间：总反应时长110min
保存条件：2-8℃避光保存，酶结合物单独避光存放
有效期：未开封有效期6个月
显色系统：经典TMB显色体系，显色灵敏、底色低
检测波长：450nm单波长检测
标准曲线绘制：5-6个浓度梯度标准品，根据OD值绘制标准曲线，计算样本浓度
特异性：特异性结合大鼠PL-A2，与磷脂酶家族其他成员无明显交叉反应
重复性：板内CV＜8%，板间CV＜10%
注意事项：样本采集后及时检测，避免蛋白活性流失；洗涤充分，去除残留杂质；避免试剂交叉污染
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
微孔板每孔上样标准品稀释液 / 待测血清样本 48μL，空白孔添加等量缓冲液，标记孔号。
每孔加入 HRP 酶标记抗体 102μL，覆膜密封，37℃孵育 55min。
倾倒废液，洗涤液注满微孔浸泡 22s，拍干水分，连续洗板 5 次。
避光添加显色液 A、B 各 50μL，轻微晃动微孔板，暗处显色 14min。
每孔滴加终止液 50μL，终止酶促显色反应，混匀体系。
清理板底污渍，酶标仪 450nm 测定 OD 值并保存数据。
绘制标准曲线，换算样本 PL-A2 浓度，复孔偏差大于 15% 该孔数据作废重测。
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