本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔预先包被大鼠ANX-Ⅴ特异性抗体，加入待测大鼠样本和标准品，样本中的ANX-Ⅴ抗原与固相抗体特异性结合，洗涤后加入酶标记二抗形成稳定免疫复合物，显色终止后检测吸光度，结合标准曲线实现ANX-Ⅴ的定量检测。
基本参数：
产品名称：大鼠膜联蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)ELISA试剂盒
英文名称：ANX-Ⅴ ELISA Kit
货号：Y-E1231
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测浓度≤0.06ng/mL
检测范围：0.15ng/mL - 6ng/mL
反应时间：总反应时长125min
保存条件：2-8℃避光保存，试剂密封防潮，禁止冷冻
有效期：未开封有效期6个月
显色系统：TMB稳定显色体系，适配凋亡相关蛋白检测
检测波长：450nm、630nm双波长检测
标准曲线绘制：梯度标准品OD值拟合曲线，定量检测ANX-Ⅴ含量
特异性：特异性识别大鼠ANX-Ⅴ，与其他膜联蛋白家族成员交叉反应率极低
重复性：板内CV＜8%，板间CV＜10%
注意事项：凋亡样本及时处理，避免蛋白降解；无钙镁污染，保证蛋白结构稳定；洗涤充分，降低背景干扰
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
预包被板每孔加入标准品稀释液 48μL，细胞凋亡上清待测样本 48μL，设置空白孔。
加入 HRP 酶标记特异性抗体 101μL，覆膜封板，37℃孵育 54min。
弃液后洗涤液注满微孔静置 28s，拍干，洗板 4 次。
避光加入显色 AB 液各 50μL，轻微摇晃板体，显色 17min。
终止液 50μL 每孔加入，终止显色并混匀孔内液体。
擦拭板底污渍，酶标仪 450nm 测定吸光度。
代入标准曲线计算 ANX-Ⅴ 含量，反映细胞凋亡相关蛋白水平。
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