本试剂盒依托酶联免疫双抗体夹心检测原理,酶标板预先包被大鼠甲状腺素(T4)特异性抗体,可特异性结合样本中的T4抗原。通过孵育结合、洗板除杂、酶标抗体结合、底物显色反应后,显色强度与样本中T4含量呈正相关。通过酶标仪检测对应吸光度,对照梯度标准曲线,可精准定量检测大鼠样本中甲状腺素的含量。
产品参数:
产品名称 | 大鼠甲状腺素(T4)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E1619 |
英文名称 | T4 ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度≤5nmol/L
检测范围:10nmol/L - 300nmol/L
反应时间:总反应时长110min(孵育80min、显色30min)
保存条件:2-8℃避光保存,激素试剂避免高温、光照
有效期:原装未开封12个月
显色系统:高稳定性TMB显色体系
检测波长:450nm,630nm校正
标准曲线绘制:6点梯度标准品检测,四参数拟合曲线,R²≥0.992
特异性:特异性识别大鼠T4,与T3等甲状腺激素无交叉反应
重复性:板内CV≤6%,板间CV≤8%
注意事项:血清样本需空腹采集,避免饮食干扰激素水平检测
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
试剂室温静置 27min,配比浓缩洗涤液配成工作液,稀释 T4 标准品,裁剪所需酶标板条。
标准孔加入梯度标准品 50μL,大鼠血清样本孔加稀释样本 50μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶结合液 100μL,封板 37℃孵育 57min。
洗板 4 次,浸泡 28s 每次,甩干液体拍干板孔。
避光加入显色 A、B 底物各 50μL,37℃避光显色 12min。
终止液 50μL 加入各孔混匀终止。
450nm 检测吸光度,换算样本甲状腺素 T4 浓度。
关键字: 大鼠甲状腺素;T4;ELISA试剂盒;
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