大鼠胶原酶II(Collagenase II)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，酶标板微孔固定抗大鼠胶原酶II特异性捕获抗体，用于捕获样本中的胶原酶II抗原。孵育结合后洗涤去除游离组分，加入酶标检测抗体形成稳定免疫复合物，通过TMB底物显色反应呈现特异性显色信号。显色深浅对应胶原酶II含量，结合标准曲线可精准定量检测大鼠样本中目标蛋白浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测灵敏度可达0.1ng/mL，可精准检测样本中微量胶原酶II含量，无交叉干扰、检测下限稳定。

检测范围：0.2ng/mL - 8ng/mL，覆盖大鼠血清、组织匀浆、细胞上清液中胶原酶II常规表达浓度区间。

反应时间：整体实验操作时长90分钟，包含温育、洗板、显色、终止全流程，其中一抗温育60分钟，底物显色15分钟。

保存条件：试剂盒全套组分2-8℃避光冷藏保存，严禁冷冻；洗板液可室温避光存放，避免高温暴晒。

有效期：未开封原装试剂盒有效期6个月，开封后组分密封避光保存，1个月内使用完毕。

显色系统：采用TMB底物显色系统，辣根过氧化物酶（HRP）催化显色反应，显色稳定、梯度清晰。

检测波长：酶标仪标准检测波长450nm，可兼容各类全自动、半自动酶标仪。

标准曲线绘制：以标准品浓度为横坐标，对应OD值为纵坐标，采用四参数Logistic拟合方程绘制标准曲线，线性拟合度R²≥0.990。

特异性：特异性识别大鼠胶原酶II，与大鼠胶原酶I、III及其他基质金属蛋白酶无明显交叉反应，特异性达标率100%。

重复性：板内变异系数CV≤8%，板间变异系数CV≤10%，实验重复性良好，数据误差可控。

注意事项：实验所有试剂需提前平衡至室温使用；洗板需彻底，避免残留液体影响显色结果；样本避免反复冻融，否则会导致蛋白降解，降低检测准确性。
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

所有试剂室温平衡 30min，稀释洗涤液，倍比稀释 Collagenase II 标准品，拆分酶标板条备用。

标品孔加对应梯度标准品 50μL，样本孔上样待测裂解液 50μL，空白孔添加稀释缓冲液。

全部孔位添加酶偶联抗体 100μL，覆膜密封，37℃孵育 63min。

洗板 5 次，浸泡 30s 每次，甩干液体并倒扣拍干微孔。

避光添加显色 A、B 液各 50μL，37℃避光显色 17min。

加入终止液 50μL 混匀终止显色。

450nm 检测吸光度，标准曲线换算 Collagenase II 结果。