本试剂盒采用双抗体夹心ELISA技术原理,固相载体包被大鼠CS特异性捕获抗体,待测大鼠样本中的CS抗原与抗体特异性结合,洗去未结合杂质后加入酶标二抗形成免疫复合物,底物显色深浅与CS含量呈正相关,通过吸光度检测及标准曲线换算,精准定量样本中CS浓度。
基本参数:

产品名称:大鼠柠檬酸合酶(CS)ELISA试剂盒
英文名称:CS ELISA Kit
货号:Y-E1060
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测浓度≤0.09U/mL,可精准检测大鼠线粒体、组织中柠檬酸合酶活性含量。
检测范围:0.1U/mL - 30U/mL,适配大鼠能量代谢、线粒体功能相关样本检测。
反应时间:总实验时长100分钟,样本孵育35min、酶孵育30min、显色20min、终止读数15min。
保存条件:2-8℃避光冷藏保存,酶试剂严禁冷冻,防止酶蛋白变性失活。
有效期:原装试剂盒有效期6个月,恒温保存性能稳定。
显色系统:特异性酶促TMB显色体系,反应专一,显色梯度清晰,无背景干扰。
检测波长:450nm检测波长,600nm校正波长,提升检测准确性。
标准曲线绘制:四参数拟合标准曲线,R²≥0.991,满足代谢酶精准定量需求。
特异性:专一识别大鼠柠檬酸合酶(CS),与三羧酸循环其他代谢酶无交叉反应。
重复性:板内CV≤8%,板间CV≤10%,实验重复性良好。
注意事项:组织样本需低温匀浆,全程冰上操作,防止CS酶活性降解;试剂使用前充分混匀。
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

微孔板每孔加入梯度稀释标准品 55μL,线粒体裂解待测样本 55μL,设立阴性对照。
全孔加入酶标记抗体工作液 95μL,封板密封,37℃孵育 56min。
孔内液体全部倾倒,洗涤液浸泡 33s,拍干,连续洗板 4 次。
避光加入显色 A、B 液各 50μL,混匀后室温显色 17min。
加入终止液 50μL 终止酶促显色,晃动微孔板混匀。
酶标仪 450nm 测定吸光度并记录数据。
标准曲线计算柠檬酸合酶浓度,反映三羧酸循环关键酶表达。
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