本试剂盒依托双抗体夹心酶联免疫吸附原理,酶标板固定抗大鼠CLU特异性抗体,加入标准品和待测大鼠样本,样本中CLU抗原与固相抗体特异性结合,后续结合酶标记检测抗体形成夹心复合物,显色反应后检测吸光度,依据标准曲线测定大鼠样本中CLU的含量。
基本参数:

产品名称:大鼠凝聚素(CLU)ELISA试剂盒
英文名称:CLU ELISA Kit
货号:Y-E1042
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测下限≤0.05ng/mL,可精准检出大鼠血清、组织中微量凝聚素蛋白。
检测范围:0.08ng/mL - 20ng/mL,覆盖大鼠炎症、损伤修复模型CLU表达区间。
反应时间:全程实验95分钟,样本孵育30min、酶孵育30min、显色20min、终止15min。
保存条件:2-8℃避光冷藏,所有试剂密封存放,避免受潮、污染。
有效期:未开封试剂盒有效期6个月,规范存放无活性衰减。
显色系统:优化TMB显色体系,显色均匀稳定,高低浓度区分度高。
检测波长:450nm主检测波长,630nm参比波长,校正系统误差。
标准曲线绘制:四参数Logistic拟合曲线,R²≥0.992,定量精准。
特异性:特异性结合大鼠凝聚素(CLU),与同源凋亡相关蛋白无交叉反应。
重复性:板内CV≤7%,板间CV≤9%,重复性优异。
注意事项:样本避免反复冻融,防止CLU蛋白降解;孵育过程保持湿度,防止孔内液体蒸发浓缩。
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

预包被板每孔上样标准品溶液 50μL,大鼠血清样本 50μL,空白孔添加稀释缓冲液。
酶结合工作液 100μL 加入各孔,封板膜封闭,37℃孵育 62min。
洗板液加满微孔静置 27s,弃液拍干,重复洗涤 5 次。
避光依次加入显色 A 液、B 液各 50μL,轻摇板体,避光显色 14min。
每孔加入终止液 50μL 终止反应,混匀孔内体系。
酶标仪 450nm 读取 OD 读数,剔除偏离过大数据。
换算凝聚素蛋白浓度,检测应激相关蛋白表达水平。
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