人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理进行检测，微孔板固相包被HMGCS1特异性捕获抗体，加入梯度标准品和待测样本后，样本中的HMGCS1抗原与固相抗体特异性结合，孵育结束后洗涤清除未结合组分，随后加入酶标记的HMGCS1检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体免疫复合物，充分洗涤后加入底物显色体系，在酶的催化作用下底物显色，颜色深浅与样本中HMGCS1的浓度成正比，终止显色反应后检测吸光度值，对照标准曲线即可准确测定样本中3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1的含量。
基本参数‌：

产品名称：人3-羟基-3-甲基戊二酰辅酶A合酶1(HMGCS1)ELISA试剂盒

英文名称：HMGCS1  Elisa Kit
货号：Y-E898

规格：48T/96T

灵敏度：最低检测值0.08ng/mL，适配代谢通路关键酶微量检测场景

检测范围：0.2ng/mL - 60ng/mL，覆盖人体脂质代谢正常及异常表达范围

反应时间：全程实验反应时长95分钟，操作步骤简洁，控时精准

保存条件：2-8℃冷藏保存，酶试剂、显色液单独避光存放，洗涤液常温避光保存即可

有效期：未开封有效期8个月，开封后密封保存，25天内使用

特异性：特异性识别HMGCS1蛋白，与HMGCS2同工酶及同类合成酶无交叉结合

重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10.5%，符合科研实验重复性要求

注意事项：细胞样本需充分裂解，去除蛋白杂质；试剂配比严格按照说明书操作，禁止随意更改稀释比例，读数需在终止后20分钟内完成
储存与有效期：

未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。

开封后保存

剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。

HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。

浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。

复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。

过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：

样本预处理：组织匀浆上清、细胞上清样本 10000r/min 离心 6min 取上清；标准品用配套稀释液完全溶解，梯度稀释制备标准曲线用液。

孔板加样：设置空白、标准、样本三类孔，空白孔加稀释缓冲液 50μL，标准孔加梯度标准品 50μL，样本孔加待测上清 50μL。

一步添加酶标抗体：所有孔直接加入 HRP 标记检测抗体 100μL，封板膜封板，水平震荡混匀。

恒温孵育：37℃避光孵育 80min，保证免疫复合物充分形成。

洗板去污：弃液后每孔加满洗涤液，浸泡 30s 弃去，重复洗板 5 次，拍干残留液体。

TMB 显色：每孔加显色液 A 50μL、显色液 B 50μL，37℃避光显色 16min。

终止读数：加终止液 50μL，酶标仪 450nm 测 OD 值，根据标准曲线计算样本 HMGCS1 表达量。
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