本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先固定人ADAMTS4特异性捕获抗体，加入梯度标准品、待测样本后，样本中的ADAMTS4抗原与固相抗体特异性免疫结合，孵育洗涤去除未结合物质，加入酶标记ADAMTS4检测抗体形成稳定夹心复合物，充分洗涤后加入底物显色体系，酶催化底物显色，产物颜色深浅与样本中ADAMTS4浓度呈正相关，终止反应后检测吸光度，对照标准曲线即可精准定量该蛋白酶的含量。
基本参数：
产品名称：人ADAM金属肽酶含血小板反应蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA试剂盒
英文名称：ADAMTS4 ELISA Kit
货号：Y-E2577
规格：48T/96T
灵敏度：最低检测0.07ng/mL，适配炎症、关节损伤低丰度酶蛋白检测
检测范围：0.15ng/mL - 55ng/mL，覆盖炎症激活、组织损伤表达区间
反应时间：全程实验时长100分钟，操作简洁高效
保存条件：2-8℃避光冷藏，酶蛋白试剂严禁冷冻、高温
有效期：未开封有效期8个月，开封后1个月内用完
特异性：特异性识别ADAMTS4蛋白，与ADAMTS家族其他亚型无交叉反应
重复性：板内CV≤8%，板间CV≤10.5%，符合科研实验标准
注意事项：细胞、关节液样本充分预处理，去除杂质；实验全程洁净操作，杜绝污染
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
样本预处理：细胞上清、血清样本 12000r/min 离心 7min 取上清；标准品用专用稀释液溶解，梯度稀释 7 组标准液。
上样加液：空白孔加基础稀释缓冲液 50μL，标准孔、样本孔依次加入对应液体 50μL。
一步添加酶标记特异性抗体：全部孔加入酶标二抗工作液 100μL，封板膜封口轻晃混匀。
孵育结合：37℃避光孵育 88min。
洗板操作：洗涤液加满每孔浸泡 42s，重复洗板 6 次，倒扣拍干残液。
显色反应：显色 A、B 液各 50μL，避光显色 21min。
终止检测：加入终止液终止酶促反应，酶标仪 450nm 测定吸光度，计算 ADAMTS4 蛋白浓度。
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