花生凝集素(PNA)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，酶标板微孔包被花生凝集素（PNA）特异性捕获抗体，待测样本中的PNA抗原与固相抗体特异性结合，洗板去除游离物质后，加入酶标记检测抗体形成抗原抗体夹心复合物，酶促底物显色后的显色程度与样本中PNA含量正相关，通过标准曲线计算可精准定量花生凝集素的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出限0.1μg/mL，精准检测花生样本、食品中PNA微量凝集素含量。

检测范围：0.2μg/mL - 110μg/mL，覆盖花生原料、加工食品、植物提取液检测区间。

反应时间：标准时长80分钟，37℃孵育35分钟，显色15分钟，快速稳定读数。

保存条件：2-8℃避光冷藏保存，防潮防杂菌污染。

有效期：严格储存条件下有效期12个月。

特异性：专一结合花生凝集素，与坚果、豆类其他凝集素无交叉反应。

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤7%，食品检测精度达标。

注意事项：高脂花生样本需脱脂预处理，避免油脂包裹抗原影响结合效率。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 25min，稀释浓缩洗涤液，拆分所需微孔板条。

标准品梯度稀释，花生粗提液离心稀释，每孔加入 58μL 标准液或待测样本上清。

一步法加入酶标记检测试剂 102μL，封板膜封闭酶标板。

37℃孵育 57min，避光完成特异性免疫结合。

洗板 5 次，每次洗涤液浸泡 27s，倒扣拍干板条废液。

避光添加显色底物液 100μL，轻晃酶标板，37℃显色 11min。

终止液终止反应，450nm 测吸光度，计算样本 PNA 凝集素浓度。