本试剂盒采用间接ELISA检测原理,将纯化的人异亮氨酰tRNA合成酶(OJ/IleRS)抗原包被于酶标板,加入待测人体血清样本,样本中的OJ特异性自身抗体与固相抗原特异性结合,洗涤去除游离杂质后,加入HRP标记的抗人Ig二抗,孵育反应后经底物显色、终止反应,检测吸光度数值,定量检测样本中OJ抗体含量,用于自身免疫性肌病的辅助筛查。
基本参数:

产品名称:人OJ抗体/抗异亮氨酰tRNA合成酶抗体(OJ/IleRS)ELISA试剂盒
英文名称:OJ/IleRS ELISA Kit
货号:Y-E2682
规格:48T/96T
灵敏度:最低检测抗体浓度0.3RU/mL,适配自身免疫性肌病抗体检测
检测范围:0.5RU/mL - 75RU/mL,覆盖自身免疫病抗体阳性表达区间
反应时间:全流程实验时长115分钟
保存条件:2-8℃低温避光保存,抗体试剂稳定性优异
有效期:原装密封有效期12个月
特异性:特异性结合OJ/IleRS抗体,与其他抗tRNA合成酶抗体无交叉反应
重复性:实验重复一致性≥97%,变异系数<8%
注意事项:血清样本无溶血、无污染;温育温度恒定,避免非特异性结合
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂盒全部试剂室温放置 34min,配制洗涤工作液;OJ 抗体标准品梯度稀释,待测血清样本静置后离心处理。
抗原预包被板分孔加样,每孔添加标准品、待测血清 100μL,空白孔加入稀释液。
一步法添加酶标记抗人 IgG 抗体工作液 100μL,混匀封板。
37℃恒温避光孵育 71min。
洗板 5 次,每孔洗涤液浸泡 40s 后拍干微孔。
显色底物避光显色 18min。
终止液终止酶促反应,15min 内酶标仪读数,计算样本 OJ 抗体含量。
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