本试剂盒依托竞争酶联免疫吸附试验原理,固相载体包被鱼类皮质醇(Cortisol)特异性抗原,样本中的皮质醇与固相抗原竞争结合酶标记特异性抗体,通过底物显色反应的深浅判定样本中皮质醇浓度,吸光度数值与皮质醇含量负相关,结合标准曲线完成定量检测。
产品参数:
产品名称 | 鱼类皮质醇(Cortisol)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E3407 |
英文名称 | Fish Cortisol ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测限0.03ng/mL,可精准检测鱼类应激状态下微量皮质醇含量
检测范围:0.05ng/mL - 50ng/mL,覆盖鱼类正常、应激、胁迫状态皮质醇浓度区间
反应时间:全流程90分钟,类固醇激素反应体系稳定
保存条件:2-8℃避光冷藏,禁止冷冻,浓缩试剂避免结晶
有效期:未开封有效期12个月,性能稳定无衰减
特异性:专一识别鱼类皮质醇,与鱼类醛固酮、糖皮质激素类似物无交叉反应
重复性:板内CV≤4%,板间CV≤6%,检测精度高
注意事项:鱼类采样全程快速操作,减少人为应激导致的皮质醇升高;样本离心后取上清,杜绝杂质干扰;显色反应严格计时,避免误差。
试剂盒组成:
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
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实验操作流程:
试剂盒全部组分室温放置 30min,稀释浓缩洗涤液,鱼血浆样本低温离心后稀释备用,标记酶标板各类孔位。
依次添加皮质醇系列标准品、待测鱼样本稀释液,空白孔加入纯稀释缓冲液,避免交叉加样污染。
一步法加入酶标记皮质醇抗原,封板覆膜后水平摇晃酶标板混匀。
37℃避光孵育 62min,进行竞争 ELISA 免疫反应。
弃去孔内反应液,洗板 5 次,每孔洗涤浸泡 33s,充分拍干微孔。
显色混合液避光显色 17min,严格控制显色时间。
终止反应并混匀,立即检测吸光度,换算鱼类样本皮质醇数值。
关键字: 鱼类皮质醇;Cortisol;ELISA试剂盒;
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