人15脂加氧酶(15-LO/LOX)ELISA试剂盒

本试剂盒依托竞争酶联免疫吸附试验原理，针对人15脂加氧酶（15-LO/LOX）构建免疫检测体系，微孔板包被目标蛋白特异性抗原，样本中的15-LO与固相抗原竞争结合酶标抗体，显色深浅与蛋白浓度呈负相关，可定量检测人体样本中15脂加氧酶的水平。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.3ng/mL，可精准检测人体微量15-LO酶蛋白含量

检测范围：0.8ng/mL - 150ng/mL，适配人血清、肺组织、血管内皮组织样本

反应时间：全流程110分钟，酶蛋白抗原抗体反应稳定

保存条件：2-8℃避光密封保存，酶活性组分严禁冷冻

有效期：原装有效期12个月，储存合规可稳定使用

特异性：专一识别人15脂加氧酶，与5-LO、12-LO等同家族酶蛋白无交叉反应

重复性：板内CV≤4%，板间CV≤7%，重复性符合科研及临床标准

注意事项：组织样本低温匀浆，防止酶蛋白变性失活；样本避免反复冻融；实验耗材无蛋白污染，保障检测准确性。
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂盒组分室温回温 34min，配制洗涤液，人细胞上清样本离心去除沉淀，酶标板标记空白、标准品、待测样本孔。

梯度标准品孔加入 15-LO 标准液，样本孔加入稀释后待测上清，空白孔添加纯稀释液。

一步法加入夹心酶标记检测抗体，封板密封微孔板，低速震荡混匀 12s。

37℃避光孵育 73min，完成固相 - 抗原 - 酶标抗体夹心结合。

弃净废液，洗板 6 次，每孔浸泡 37s，多次拍干微孔内部残留洗液。

显色液避光显色 21min，观察标准品显色梯度层级。

加入终止液混匀终止反应，酶标仪测值后拟合标准曲线定量 15 脂加氧酶浓度。