人16α羟基雌酮1(16-α OHE-1)ELISA试剂盒

本试剂盒采用竞争ELISA检测原理，固相载体包被人16α羟基雌酮1（16-α OHE-1）特异性抗原，样本中的目标物质与固相抗原竞争结合特异性酶标抗体，底物显色后检测吸光度，结合标准曲线精准定量人体样本中16-α OHE-1的含量。
产品参数：

‌灵敏度：最低检测限0.4pg/mL，可精准检测人体微量雌激素代谢物

检测范围：1pg/mL - 300pg/mL，适配人血清、血浆激素代谢检测样本

反应时间：全流程105分钟，雌激素代谢物反应体系适配性强

保存条件：2-8℃避光冷藏，禁止冷冻，试剂密封防潮

有效期：原装有效期12个月，性能稳定

特异性：特异性识别16-α OHE-1，与雌酮、雌二醇等雌激素母体无交叉反应

重复性：板内CV≤5%，板间CV≤6%，实验误差小

注意事项：样本采集后低温保存，避免激素代谢物降解；全程避光操作，防止底物氧化；严格恒温孵育，保证反应一致性。
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂室温平衡 31min，稀释浓缩洗涤液，人血清样本避光稀释预处理，酶标板划分检测微孔组别。

微孔依次加入 16-α OHE-1 梯度标准品、稀释待测血清样本，空白孔添加稀释缓冲液。

一步法加入酶标记竞争抗原工作液，封板覆膜封闭酶标板，轻柔摇匀孔内液体。

37℃避光孵育 64min，避免光照导致标记物失活。

倒掉孔内反应废液，洗板 5 次，每孔洗涤浸泡 31s，彻底拍干微孔。

TMB 显色混合液避光显色 19min，严格控制显色时长。

终止液终止显色反应，混匀后立即上机检测吸光度，换算样本激素含量。