人α肌动蛋白(α Actin)ELISA试剂盒

本试剂盒依托经典双抗体夹心ELISA技术，微孔板预先包被人α肌动蛋白（α Actin）特异性捕获抗体，待测样本与标准品中的α Actin抗原可特异性结合固相抗体，洗涤去除未结合杂质后，加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体形成免疫复合物，再次洗涤后发生酶促显色反应，终止反应后测定吸光度，以此精准定量检测样本中α Actin的浓度。
产品参数：

‌1.灵敏度：检出下限≤1.6ng/mL

2.检测范围：3.2ng/mL - 102.4ng/mL

3.反应时间：孵育 69min，二抗 35min，显色 12min

4.显色系统：单组分避光型 TMB 显色底物

5.检测波长：450nm，参比 600nm

6.特异性：识别人 α- 肌动蛋白单体，不识别 F - 肌动蛋白多聚体

7.重复性：批内 CV≤6%，批间 CV≤8.6%

8.注意事项：开盖操作底物液全程避光，光照会提前氧化显色造成背景升高
试剂盒组成：

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物

标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据

生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点

辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色

底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化

终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果

浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质

封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发

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实验操作流程：

1. 试剂盒试剂室温放置 28min 回温，稀释洗涤浓缩液，标准品梯度稀释分装，待测样本充分混匀。

2. 划分空白、标准、样本三类孔位，标准孔加对应浓度标准品 50μL，样本孔加入待测样本 50μL，空白孔空置。

3. 除去空白孔，其余每孔加入酶结合工作液 100μL，封板膜严密封口，水平摇晃酶标板混匀。

4. 37℃避光孵育 57min，酶标板单层放置于孵育箱。

5. 撕开封板膜倒弃废液，洗涤液浸泡 28s 甩干，循环洗板 4 次，吸干板孔水分。

6. 避光依次添加显色液 A、B 各 50μL，震荡混匀，37℃避光显色 17min。

7. 加入终止液终止酶促显色，酶标仪读取吸光度数值，拟合标准曲线计算 α Actin 含量。