本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理定量检测人血清、血浆等样本中的α突触核蛋白,酶标板微孔固相化特异性α-SYN单克隆抗体,加入样本与标准品后,目标抗原特异性结合于固相抗体表面,洗涤去除游离杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的检测抗体,形成免疫夹心复合物,催化底物发生显色反应,反应深浅与样本中α-SYN含量成正比,通过标准曲线拟合即可测定样本中α突触核蛋白的具体浓度。
产品参数:
产品名称 | 人α突触核蛋白(α-SYN)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2675 |
英文名称 | α-SYN ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
1.灵敏度:最低检测限≤2pg/mL
2.检测范围:7.8~500pg/mL
3.反应时间:一抗包被板孵育 90min,二抗孵育 45min,显色 20min
4.显色系统:TMB 双组分显色体系
5.检测波长:450nm 单波长检测
6.特异性:识别天然及重组人 α-SYN,不结合 β、γ 突触核蛋白
7.重复性:板内变异系数≤5.5%,板间变异系数≤7.5%
8.注意事项:脑脊液样本需 4℃离心去除杂质;终止液为强酸,防止皮肤接触
关键注意事项:
本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
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实验操作流程:
试剂盒试剂室温回温 25min,用样本稀释液倍比稀释冻干标准品,设置空白对照孔、梯度标准品孔、待测样品孔并做好板位编号。
按孔位顺序向酶标板微孔内分别添加标准品稀释液、患者待测上清 / 血清样本,空白孔只添加基础稀释液,加样枪垂直加样防止交叉污染。
无需洗板,直接向每孔加入辣根过氧化物酶标记抗体工作液,覆膜封板,37℃恒温孵育 50min,实现捕获抗体 - 抗原 - 酶标抗体夹心一步反应。
撕掉封板膜,倾倒孔中废液,每孔注满洗板液浸泡 40s 后倒扣拍净,连续洗板 4 次,彻底去除未结合游离蛋白与酶标复合物。
避光条件下每孔依次加入 TMB 显色液 A、显色液 B,水平缓慢晃动酶标板 10s 混匀,室温暗处孵育 12min 进行显色反应。
快速向所有微孔加入硫酸终止液,终止催化显色反应,充分震荡酶标板使每孔反应体系混合均匀。
即刻使用酶标仪在 450nm 波长测定每孔吸光数值,依托标准曲线拟合方程,换算得出样本内 α-SYN 含量。
关键字: 人α突触核蛋白;α-SYN;ELISA试剂盒;
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