人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶(γ-ECS)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理检测人γ谷氨酰半胱氨酸合成酶含量，酶标板微孔固定γ-ECS特异性捕获抗体，加入样本和标准品后，样本中的目标酶蛋白抗原被固相抗体特异性捕获，洗涤去除非特异性结合杂质，加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，底物显色反应强度与γ-ECS含量正相关，结合标准曲线完成精准定量检测。
产品参数：

‌1.灵敏度：检出下限 0.08ng/mL

2.检测范围：0.25~16ng/mL

3.反应时间：样本孵育 86min，酶结合物 54min，显色 21min

4.显色系统：双液混合 TMB 显色底物

5.检测波长：450nm，校正 630nm

6.特异性：仅识别人 γ-ECS 催化亚基，谷胱甘肽合成通路其他酶无交叉

7.重复性：板内 CV≤6.8%，板间 CV≤8.8%

8.注意事项：样本中不可含高浓度还原剂，会干扰酶促显色反应
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂室温回温 38min，标准品用配套稀释液配制梯度浓度，组织匀浆上清样本预处理去除杂质，酶标板分区标记孔位类型。

向微孔依次加入标准工作液、待测匀浆上清，空白孔加入稀释缓冲液，垂直缓慢加样防止液体交叉渗漏。

直接加入酶结合检测抗体工作液，封板避光 37℃孵育 79min，一步完成夹心免疫反应。

揭膜倒掉孔内废液，洗涤液加满微孔浸泡 43s 甩干，重复洗板 6 次，拍干板条多余洗液。

避光加入显色底物 A、B 液，轻柔混匀后避光显色 20min。

滴加终止液终止酶促显色，充分摇晃酶标板混匀各孔反应体系。

450nm 波长酶标仪测定吸光度，对照标准曲线计算 γ-ECS 含量。