人癌蛋白诱导转录物3(OIT3)ELISA试剂盒

本试剂盒依托双抗体夹心ELISA原理检测人样本中癌蛋白诱导转录物3(OIT3)含量。微孔板表面包被OIT3特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本中的OIT3抗原与固相抗体特异性免疫结合，经洗涤去除未结合组分。加入HRP标记的OIT3检测抗体，形成完整的夹心免疫复合物，洗涤后加入TMB显色底物，在酶的催化下发生显色反应，终止反应后通过酶标仪测定吸光度。吸光度数值与样本中OIT3的浓度呈正相关，依据标准曲线即可精准定量检测OIT3表达水平。
产品参数：

‌灵敏度：≤6pg/mL

检测范围：20pg/mL–1200pg/mL

反应时间：样本孵育 75min，二抗 35min，显色 16min

显色系统：HRP 催化 TMB 显色

检测波长：450nm

特异性：不结合同家族其他转录调控蛋白

重复性：板内 CV≤5.8%，板间 CV≤7.8%

注意事项：细胞裂解液样本需离心去除沉淀杂质后上样
关键注意事项：

本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。

全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。

移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。

孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。

洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。

终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。

终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。

实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。

不同批次试剂盒组分不可混用。

试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。

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实验操作流程：

试剂盒室温静置 30min 回温，取出酶标板固定于板架，按需划分实验孔位并编号。

标准品孔加入梯度稀释 OIT3 标准品 50μL；待测孔加入组织裂解稀释样本 50μL；空白孔无加样。

向全部检测孔添加一步法酶偶联抗体工作液 50μL，震荡混匀微孔体系，封板膜密封。

37℃恒温孵育 68min，孵育期间不可挪动酶标板。

弃去孔内液体，洗涤液加满每孔浸泡 35s，彻底拍干，循环洗板 5 次。

每孔加入显色 A 液、B 液各 50μL，避光混匀，37℃避光显色 17min。

滴加终止液 50μL 混匀终止反应，5~10min 内 450nm 测定 OD 值，换算样本 OIT3 浓度。