人癌胚铁蛋白(CEF) ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法检测人样本中的癌胚铁蛋白(CEF)。将CEF特异性抗体包被于微孔板固相表面作为捕获抗体，加入待测样本后，样本内的CEF抗原与固相抗体发生特异性结合，洗除游离杂质与非特异性结合物。随后加入HRP标记的CEF检测抗体，形成夹心免疫复合物，经洗涤后加入TMB显色底物进行酶促反应，显色深浅与CEF含量正相关。终止反应后通过酶标仪测定吸光度，结合标准曲线即可定量检测样本中CEF的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：≤3ng/mL

检测范围：10ng/mL–1500ng/mL

反应时间：样本孵育 70min，酶结合物 40min，显色 14min

显色系统：OPD 显色，2M H₂SO₄终止

检测波长：492nm

特异性：区分普通血清铁蛋白与癌胚型铁蛋白，交叉反应＜5%

重复性：板内 CV＜6.8%，板间 CV＜8.8%

注意事项：重度溶血样本血红蛋白会干扰铁蛋白类指标检测
关键注意事项：

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书，不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异

所有试剂需按要求储存，未用完的试剂需密封后放回规定温度（通常2-8℃或-20℃）

避免试剂污染，不同组分的移液器枪头需分开使用

洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖，防止出现假阳性结果

显色过程需避光，避免阳光直射影响结果

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实验操作流程：

试剂盒室温平衡 33min，取出酶标板拆分板条固定，区分标准孔、待测样本孔、空白对照孔。

标准孔添加倍比稀释 CEF 标准溶液 50μL；样本孔加入预处理体液样本 50μL；空白孔空置不加样。

非空白孔加入一步法免疫酶结合混合液 50μL，缓慢晃动酶板混匀体系，密封封板膜。

37℃恒温避光孵育 72min，防止光照造成底物提前分解。

倒扣酶板倒出废液，洗板液加满微孔浸泡 40s，拍干，重复洗板 6 次。

每孔加入显色液 A、B 各 50μL，避光震荡混匀，37℃避光显色 19min。

加入终止液 50μL 终止显色反应，混匀后酶标仪 450nm 检测吸光值，对照标准曲线得出 CEF 含量。