本试剂盒基于间接ELISA检测原理，微孔板包被高纯度人蛋白酶3特异性抗原，待测样本中的PR3-ANCA可与固相抗原特异性免疫结合，洗去游离无关物质后，加入辣根过氧化物酶标记的二抗与目标抗体结合，随后加入显色底物发生显色反应，终止反应后测定吸光度，数值大小与样本中PR3-ANCA浓度成正比，可精准定量检测该特异性抗体含量。
基本参数：
产品名称：人蛋白酶3特异性抗中性粒细胞胞质抗体(PR3-ANCA)ELISA试剂盒
英文名称：PR3-ANCA ELISA Kit
货号：Y-E2636
规格：48T/96T
灵敏度：≤0.8AU/mL
检测范围：1.6AU/mL - 100AU/mL
反应时间：总时长 145min（样本 80min，二抗 45min，避光显色 20min）
显色系统：改良间接 ELISA TMB 显色体系
检测波长：450nm+620nm
特异性：专一识别 PR3 靶抗原介导 ANCA 抗体，与 MPO-ANCA 无交叉
重复性：板内 CV＜5.7%，板间 CV＜7.3%
注意事项：试剂盒所有组分避免冻融，冻融后试剂活性大幅下降
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒常温放置 33min，稀释浓缩洗涤液，梯度稀释 PR3-ANCA 参考标准品，划分酶标板孔位类别。
各孔添加标准品、稀释待测血清样本、空白稀释液，加入一步法酶标抗体液，覆膜封板。
37℃避光孵育 70min，固相载体上完成免疫结合。
撕掉封板倾倒废液，洗涤液加满浸泡 35s，洗板 5 次，吸水纸拍干。
加入显色液 A、B 混匀，37℃避光显色 20min。
加入终止液终止酶促显色，水平摇匀酶标板。
酶标仪 450nm 测吸光值，定量检测样本 PR3-ANCA 水平。
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