人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心ELISA原理，微孔板固相包被LMP7/PSMB9特异性捕获抗体，待测样本中的目标蛋白抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记检测抗体形成夹心免疫复合物，去除游离杂质后加入显色底物，酶促反应产生有色显色产物，显色强度与样本中LMP7/PSMB9蛋白含量成正比，通过酶标仪检测吸光度并对照标准曲线实现定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人低分子质量蛋白7/β型蛋白酶体9(LMP7/PSMB9)ELISA试剂盒

英文名称：LMP7/PSMB9 Elisa Kit
货号：Y-E3135

规格：48T/96T

灵敏度：≤0.08ng/mL

检测范围：0.16ng/mL - 10.24ng/mL

反应时间：总时长 155min（样本 85min，二抗 50min，显色 20min）

显色系统：增强型稳定 TMB 显色底物

检测波长：450nm，参考 570nm

特异性：靶向 PSMB9 编码 LMP7 单体，蛋白酶体其他亚基无交叉识别

重复性：板内 CV＜5.4%，板间 CV＜6.8%

注意事项：细胞样本需冰上裂解，全程低温防止蛋白酶体复合体解离降解
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒常温放置 34min，稀释洗涤液，逐级稀释 LMP7 标准品，酶标板划分不同功能孔并编号。

各孔添加梯度标准品、稀释待测样本、空白稀释液，加入酶标记抗体工作液，封板密闭。

37℃避光孵育 74min，一步夹心结合靶蛋白。

弃净孔内反应液，洗涤液浸泡 35s，洗板 5 次，倒扣在吸水纸上拍干。

加入显色双底物混匀，37℃避光显色 22min。

加入终止液停止显色，摇匀酶标板整体体系。

450nm 波长读取 OD 值，计算样本 LMP7/PSMB9 蛋白浓度。
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