本试剂盒运用双抗体夹心酶免疫分析法原理,微孔板预先包被纯化的人FASL特异性捕获抗体,加入待测样本和标准品后,样本中的FASL抗原与固相捕获抗体特异性结合,经洗涤去除未结合的无关物质,再加入酶标记检测抗体,与结合的抗原形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物,底物显色后产生有色产物,产物吸光度与样本中FASL浓度呈正相关,通过标准曲线拟合计算,即可准确测定样本中人FASL的含量。
基本参数:

产品名称:人凋亡相关因子配体(FASL)ELISA试剂盒
英文名称:FASL Elisa Kit
货号:Y-E172
规格:48T/96T
灵敏度:检出下限≤0.08ng/L
检测范围:0.25ng/L~16ng/L
反应时间:样本 37℃孵育 90min,酶结合物 37℃30min,显色室温 10min
显色系统:单瓶预混 TMB 显色底物
检测波长:主波长 450nm,参比 600nm
特异性:特异性针对人 FASL,与 TNF-α、TRAIL 无交叉识别
重复性:板内 CV<5.5%,板间 CV<9.5%
注意事项:血清样本需离心去除血凝块杂质,否则易出现非特异吸光值偏高
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温放置 35min 回温,浓缩洗涤液纯水稀释配制工作洗涤液,取出实验酶标板条,未使用微孔板密封冷藏。
划分孔位组别,标准品孔加入梯度稀释标准品 50μL,样本孔加入待测上清 / 血清样本 50μL,空白孔不添加任何溶液。
所有反应孔直接加入一步法酶联试剂 100μL,手动轻晃酶标板混匀液体,封板膜严实封口。
37℃恒温孵育 70min,孵育环境避光防尘,保证反应体系稳定结合。
去除封板膜,倒掉孔中废液,加满洗涤液浸泡 35s 后用力拍干,重复洗板 6 次,微孔内无挂液水珠。
依次添加显色 A 液、B 液各 50μL,避光震荡混匀,37℃避光显色 18min,观察孔内呈现蓝色渐变。
滴加终止液 50μL 终止反应,溶液由蓝变黄后立即上机,450nm 检测 OD 值,拟合标准曲线计算 FASL 浓度。
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