本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，以包被于微孔板的人ASK-1特异性抗体为固相捕获载体，加入待测生物样本及标准品，样本中的ASK-1蛋白抗原可与固相抗体特异性结合，洗涤洗去未结合组分后，加入辣根过氧化物酶标记的抗ASK-1抗体进行特异性结合，形成免疫夹心复合物，经底物显色、终止反应后，利用酶标仪检测吸光度数值，根据标准曲线对应的浓度梯度，定量检测出样本中ASK-1的表达含量。
基本参数：
产品名称：人凋亡信号调节激酶I(ASK-1)ELISA试剂盒
英文名称：ASK-1 Elisa Kit
货号：Y-E261
规格：48T/96T
灵敏度：最低可测浓度 0.03ng/mL
检测范围：0.1ng/mL～6.4ng/mL
反应时间：封闭后样本孵育 70min，酶标记物 35min，显色 18min
显色系统：HRP 催化 TMB 显色体系
检测波长：450nm 单波长读数
特异性：仅靶向人 ASK1 蛋白激酶结构域，同家族 MAPKKK 无交叉反应
重复性：批内 CV≤5%，批间 CV≤9%
注意事项：试剂盒开封后 1 个月内用完，标准品稀释后不可重复使用
试剂盒组成：
预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原，结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线，定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物，提供酶结合位点
辣根过氧化物酶（HRP）标记亲和素 1瓶 与生物素结合，催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物，产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应，稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板，去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下：
试剂盒所有试剂室温平衡 30min，按配比稀释洗涤液，拆分酶标板，只用实验所需条板，剩余板条密封低温保存。
设置空白、标准、样本三类孔，标准品孔加入倍比稀释标准品 50μL，样本孔加入离心预处理待测样本 50μL，空白孔不加样。
每孔直接加入酶标记结合液 100μL，横向晃动酶板混匀，封板膜密封微孔板边缘。
37℃恒温培养箱孵育 55min，禁止挪动酶标板避免孔间交叉污染。
揭膜弃液，每孔灌满洗涤液静置 30s，倒扣于吸水纸上拍干，循环洗板 5 次。
每孔加入显色液 A、B 各 50μL，避光混匀，37℃避光显色 14min。
加入终止液 50μL 混匀终止反应，10 分钟内酶标仪 450nm 读数，绘制标准曲线定量 ASK-1 表达量。
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