人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒

本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验原理，微孔板预先包被人DT特异性捕获抗体，加入待测样本及标准品，样本中的DT抗原与固相抗体特异性免疫结合，洗板清除游离杂质后，加入酶标记DT检测抗体，形成固相抗体-抗原-酶标抗体复合物，显色反应强度与DT抗原含量正相关，通过吸光度检测与标准曲线换算，完成样本DT含量的定量分析。
基本参数‌：

产品名称：人多巴色素异构酶(DT)ELISA试剂盒

英文名称：DT Elisa Kit
货号：Y-E3066

规格：48T/96T

灵敏度：检出下限≤0.12pg/mL

检测范围：3.75pg/mL～240pg/mL

反应时间：室温避光孵育 92min，二抗 52min，显色 18min

显色系统：增强信号 TMB 显色体系

检测波长：450nm 单波长读取 OD 值

特异性：特异性识别人多巴色素异构酶，酪氨酸酶家族无交叉结合

重复性：板内 CV＜7%，板间 CV＜11.2%

注意事项：黑色素细胞裂解样本避免反复冻融三次以上
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒室温平衡 29min，配比稀释洗涤缓冲液，取用所需微孔板条，多余板条密封冷藏。

分组上样，标准品、待测样本每孔 50μL，空白对照孔不加任何液体。

直接添加一步法酶联试剂 100μL 至各孔，轻摇混匀后封板。

37℃恒温孵育 68min，避免温度波动。

撕除封板膜，弃液洗板，每次浸泡 35s 拍干，洗板 5 次。

避光添加显色双底物各 50μL，摇匀后 37℃显色 15min。

终止液终止反应，10min 内 450nm 读数，定量检测 DT 水平。
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