本试剂盒基于双抗体夹心酶免疫检测原理,微孔板包被人PARP特异性单克隆捕获抗体,加入待测样本与系列标准品,样本中的PARP抗原与固相抗体特异性结合,经洗板纯化后,加入辣根过氧化物酶标记的PARP检测抗体,形成特异性免疫夹心复合物,显色终止后检测吸光度,根据标准曲线对应数值,定量测定样本中人PARP的表达含量。
基本参数:

产品名称:人多聚ADP核糖聚合酶(PARP)ELISA试剂盒
英文名称:PARP Elisa Kit
货号:Y-E934
规格:48T/96T
灵敏度:检测极限 0.02ng/mL
检测范围:0.06ng/mL~3.84ng/mL
反应时间:样本 37℃88min,二抗 46min,显色 17min
显色系统:即用型预混显色底物
检测波长:450nm+600nm 双波长
特异性:主要识别 PARP-1,与 PARP 家族其他亚型弱交叉
重复性:板内 CV<5.1%,板间 CV<9.1%
注意事项:凋亡诱导样本及时裂解,防止 PARP 剪切片段干扰定量
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温放置 30min,配制洗涤工作液,取出酶标板条,剩余微孔板密封 2~8℃保存。
标准品孔加梯度稀释标品 50μL,样本孔加细胞裂解待测样本 50μL,空白孔不上样。
全部孔位加入酶结合工作液 100μL,混匀覆膜封板。
37℃避光孵育 70min,防止光照破坏反应体系。
揭膜弃液,洗板液浸泡 40s 拍干,重复洗板 6 次。
避光添加显色 A、B 液各 50μL,摇匀后 37℃显色 18min。
终止液终止反应,450nm 读取吸光度,定量 PARP 含量。
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