人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶免疫吸附原理，微孔板包被高特异性人PTN抗体作为固相载体，加入待测样本及梯度标准品，样本中的PTN生长因子抗原与固相抗体特异性结合，去除游离杂质后，加入酶标记二抗形成免疫复合物，底物显色产生有色产物，颜色强度与PTN含量成正比，检测吸光度并对照标准曲线，完成样本PTN的定量检测。
基本参数‌：

产品名称：人多效生长因子(PTN)ELISA试剂盒

英文名称：PTN  Elisa Kit
货号：Y-E047

规格：48T/96T

灵敏度：检出极限 0.05ng/mL

检测范围：0.16ng/mL～10.24ng/mL

反应时间：37℃样本 66min，二抗 34min，显色 12min

显色系统：单组分避光储存显色底物

检测波长：450nm 主检测波长

特异性：专一识别人 PTN，与 Midkine 同源蛋白交叉＜6%

重复性：板内 CV＜5.3%，板间 CV＜9.3%

注意事项：细胞上清样本过滤除菌后再上机检测
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

试剂盒全部试剂室温平衡 28min，稀释浓缩洗涤液，取出酶标板条，剩余板条密封避光保存。

分区上样，标准梯度液、待测样本每孔 50μL，空白对照孔无添加。

直接加入一步法酶工作液 100μL，震荡混匀后封板。

37℃避光孵育 64min，避免强光直射。

倒净孔内废液，洗涤液浸泡 35s 拍干，重复洗板 5 次。

避光加入显色 A、B 液各 50μL，混匀后 37℃显色 16min。

终止液终止显色，450nm 读取吸光值，换算 PTN 样本浓度。
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