本试剂盒依托抗原抗体特异性结合及酶促显色放大原理,采用双抗体夹心法检测样本中人补体调节蛋白含量,微孔板包被CCP特异性捕获抗体,加入待测样本后捕获样本中的靶蛋白,结合酶标特异性二抗形成免疫复合物,洗涤净化体系后加入底物显色,显色强度与样本中CCP含量呈正相关,通过检测吸光度并对照标准曲线,可精准定量待测样本中的人补体调节蛋白浓度。
产品参数:
产品名称 | 人补体调节蛋白(CCP)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2772 |
英文名称 | CCP ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检测浓度 0.08ng/mL
检测范围:0.25ng/mL–16ng/mL
反应时间:总反应 130min,样本室温孵育 70min,酶结合物 40min,显色 20min
显色系统:可溶性 TMB 显色体系,酸性终止
检测波长:450nm,建议设置 600nm 校正背景
特异性:针对人 CCP 保守抗原位点,与人源其他补体调控蛋白无明显交叉
重复性:批内 CV<7.0%,批间 CV<9.0%
注意事项:血清样本需室温静置 30min 再分离;所有试剂使用前平衡至室温;洗板不可剧烈冲击孔底包被层。
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
试剂盒试剂室温放置 35min,使用配套稀释液配制 CCP 梯度标准品,在酶标板侧面标注各类样本对应孔号。
向标准孔、样品孔、空白孔分别加入 CCP 标准溶液、待测上清样本、空白稀释液,加样顺序从低浓度至高浓度。
一步法加入酶标记 CCP 特异性抗体工作液,覆膜密封板条,37℃恒温孵育 70min 进行免疫结合反应。
弃除板内液体,每孔加满洗涤缓冲液浸泡 40s 后甩干,循环洗板 6 次,孔底无挂液残留。
加入显色混合液,避光室温孵育 18min,直至标准品最高浓度孔呈现明显深蓝色。
逐孔添加终止液终止显色反应,水平晃动酶标板使试剂充分混匀。
450nm 波长检测各孔 OD 数值,拟合标准曲线计算样本 CCP 含量,留存酶标板原始读数记录。
关键字: 人补体调节蛋白;CCP;ELISA试剂盒;
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