本试剂盒依托抗原抗体特异性免疫反应与酶催化显色原理,微孔板包被人泛素激活酶(E1/UBAE)特异性捕获抗体,样本中的E1/UBAE抗原与固相抗体结合后,与酶标检测抗体形成夹心免疫复合物,经洗涤纯化、底物显色及终止反应后,检测吸光度数值,即可定量测定样本中人泛素激活酶的浓度。
基本参数:

产品名称:人泛素激活酶(E1/UBAE)ELISA试剂盒
英文名称:E1/UBAE Elisa Kit
货号:Y-E3071
规格:48T/96T
灵敏度:最小可测 0.13ng/mL
检测范围:0.5ng/mL - 40ng/mL
反应时间:样本结合 90min,二抗孵育 50min,避光显色 21min
显色系统:OPD 底物显色,避光反应后终止
检测波长:492nm,参考 630nm
特异性:精准识别 UBAE E1 活化酶,不结合泛素结合、连接酶组分
重复性:板内 CV≤6.6%,板间 CV≤8.8%
注意事项:样本不可高温灭活,会直接破坏 E1 蛋白构象导致结果偏低
关键注意事项:

实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
实验步骤如下:

试剂盒试剂室温平衡 38min,稀释洗涤工作液,逐级稀释 E1 标准品,标记空白、标准、样本孔位置。
每孔加入标准品 / 样本 / 稀释液 50μL,立刻加入一步法酶标记工作液 100μL,封板密封。
37℃避光孵育 70min,不可挪动酶标板位置。
弃除废液,洗涤液浸泡每孔 32s,倒扣拍干,重复洗板 4 次。
每孔加入 TMB 显色液 100μL,避光 37℃显色 15min。
每孔加入终止液 50μL,轻摇混匀终止显色。
15min 内 450nm 读值,计算样本中 E1/UBAE 浓度。
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关键字: 人泛素激活酶;E1/UBAE;ELISA试剂盒;
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