本试剂盒依托双抗体夹心ELISA核心原理,微孔板包被人分泌成分(SC)特异性抗体,孵育后样本中的SC抗原与固相抗体特异性识别结合,结合酶标检测抗体形成稳定免疫复合物,洗涤纯化后进行酶促底物显色,通过检测吸光度值,对照标准曲线定量测定样本中人SC的含量。
基本参数:

产品名称:人分泌成分(SC)ELISA试剂盒
英文名称:SC ELISA Kit
货号:Y-E2688
规格:48T/96T
灵敏度:最小检出 0.09ng/mL
检测范围:0.3ng/mL - 32ng/mL
反应时间:封闭 28min,样本孵育 94min,二抗 51min,显色 22min
显色系统:OPD 底物显色,避光反应终止
检测波长:490nm
特异性:特异性结合 IgA 分泌片段,游离 IgA 交叉反应<2.6%
重复性:批内 CV≤5.6%,批间 CV≤7.8%
注意事项:唾液、肠液样本需过滤除菌,微生物会分解 SC 抗原结构
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

试剂室温平衡 31min,稀释浓缩洗涤液,逐级稀释 SC 标准品,标记酶标板空白、标准、样本及复孔。
每孔加入对应检测液 50μL,立刻加入一步法免疫酶工作液 100μL,封板膜封闭板口。
37℃避光孵育 47min,酶标板平放无堆叠。
倒掉孔内废液,洗涤液注满浸泡 39s,拍干,洗板 6 次。
分加显色 A 液、B 液各 50μL,混匀后 37℃避光显色 16min。
滴加终止液 50μL 每孔,充分混匀终止显色。
酶标仪 450nm 读数,拟合标准曲线计算分泌成分 SC 浓度。
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