本试剂盒采用间接ELISA检测原理,固相酶标板包被纯化的Sa抗原,加入待测样本后,样本中的抗Sa抗体与微孔内固相抗原特异性结合,洗板清除游离组分,再加入酶标记抗人特异性二抗孵育结合,经底物显色、终止反应后,测定各孔吸光度值,结合标准曲线定量检测样本中抗Sa抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人抗Sa抗体(anti-Sa-Ab)ELISA试剂盒
英文名称:anti-Sa-antibody Elisa Kit
货号:Y-E444
规格:48T/96T
灵敏度:0.15RU/mL
检测范围:0.3–28RU/mL
反应时间:样本孵育 75min,二抗 50min,显色 14min,总 139min
保存条件:2~8℃储存,开封后试剂 4 周内使用完毕
显色系统:TMB A+B 混合显色
检测波长:450nm,参比 630nm
标准曲线绘制:五点标准品四参数拟合曲线定量
注意事项:类风湿关节炎样本检出率较高;溶血、高脂血清建议弃用
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

血清样本提纯
静脉血凝固后离心分离上清,脂血样本静置分层后取上层澄清血清,去除杂质沉淀。
试剂稀释回温
所有试剂室温平衡 32min,浓缩洗涤液按照说明书比例稀释混匀。
标准品梯度配制
Sa 抗体标准品复溶后梯度稀释,依次加 50μL 至对应标准微孔,设立阴阳对照孔。
一步法加样孵育
待测样本 50μL,加入 HRP 标记 Sa 抗原工作液 50μL,封板 37℃孵育 60min。
多次洗板流程
弃液后洗涤液浸泡 40s 拍干,连续洗板 5 次,每次充分吸干微孔残留液体。
底物显色反应
加入 TMB 显色液 100μL,避光 37℃显色 17min。
终止上机检测
终止液终止反应,450nm 测定吸光度,标准曲线计算抗体含量。
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