人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒

本试剂盒基于间接酶联免疫吸附原理，酶标板微孔固定包被人白蛋白抗原，待测样本中的抗白蛋白抗体可与固相白蛋白抗原特异性结合，洗涤清除游离杂质后，加入酶标记抗人二抗孵育反应，后续经显色、终止步骤，通过酶标仪检测吸光度，结合标准曲线定量检测样本中人抗白蛋白抗体的含量。
基本参数‌：

产品名称：人抗白蛋白抗体(AAA)ELISA试剂盒

英文名称：AAA Elisa Kit
货号：Y-E442

规格：48T/96T

灵敏度：0.1μg/mL

检测范围：0.2–12μg/mL

反应时间：样本结合 70min，酶标二抗 45min，显色 15min，总 130min

保存条件：试剂盒 2～8℃，洗涤浓缩液常温放置

显色系统：双液混合 TMB 显色

检测波长：450nm

标准曲线绘制：梯度标准品构建线性标准曲线定量

注意事项：输注异体蛋白样本易产生该抗体；加样枪头一次性更换杜绝交叉污染
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。
实验步骤如下：

样本制备

采集血清样本自然凝固离心取上清，样本若浓度过高可预先用样本稀释液 1:5 稀释后检测。

试剂回温配制

所有试剂室温平衡 35min，稀释浓缩洗涤液配制成工作洗涤液，现配现用。

标准品梯度稀释

AAA 标准品溶解后梯度稀释 7 组浓度，每标准孔添加 50μL 标准品稀释液。

样本标记物同步加样

待测样本 50μL 入孔，加入 HRP 标记人白蛋白抗原 50μL，封板 37℃孵育 63min。

洗板除杂操作

倒掉孔内反应液，洗涤液浸泡 40s 拍干，连续洗板 4 次，吸干微孔残留液体。

显色避光培育

加入 TMB 显色液 100μL，37℃避光显色 15min。

终止读数判量

终止液终止显色，酶标仪 450nm 测 OD 值，计算样本抗白蛋白抗体含量。
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