本试剂盒基于间接ELISA检测原理,酶标板微孔包被高纯度丙型肝炎病毒特异性抗原,加入待测样本后,样本中的抗HCV抗体与固相抗原特异性免疫结合,洗板清除未结合杂蛋白,加入酶标记抗人二抗孵育反应,通过底物显色、终止反应后检测吸光度,结合标准曲线定量检测样本中抗丙型肝炎病毒抗体的含量。
基本参数:

产品名称:人抗丙型肝炎病毒抗体(anti-HCV)ELISA试剂盒
英文名称:anti-HCV Elisa Kit
货号:Y-E554
规格:48T/96T
灵敏度:可检出 0.3NCU/mL 抗体
检测范围:定性阴阳性筛查,定量 0.4–26COI
反应时间:样本孵育 80min,酶结合物 55min,显色 16min,总 151min
保存条件:2~8℃冷藏,试剂盒开封后 1 个月内用完
显色系统:TMB 双组份显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:阴性对照均值设定临界值,COI 值大于 1 判定为阳性
注意事项:窗口期样本易漏检;溶血、黄疸血清会干扰本底
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

样本采集处理
血清样本凝固离心取上清,溶血、严重脂血样本不可用于检测,样本可 4℃保存 24h。
试剂室温回温
整套试剂盒试剂室温放置 30min,浓缩洗涤液稀释配比完成,搅拌均匀。
标准品梯度加样
HCV 抗体标准品复溶倍比稀释 7 个梯度,每标准孔添加 50μL 标准品稀释液。
一步法抗原抗体孵育
待测样本 50μL,加入 HRP 标记 HCV 抗原混合液 50μL,封板 37℃孵育 60min。
微孔洗涤步骤
弃净孔内液体,洗涤液浸泡 40s 拍干,循环洗板 5 次,防止非特异性吸附。
避光底物显色
每孔加入显色液 A、B 各 50μL,遮光 37℃显色 13min。
终止判读结果
终止液终止反应,450nm 测 OD 值,依据 cut-off 值判定 HCV 抗体阴阳性。
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