人肌细胞生成素(MYOG)ELISA试剂盒

本试剂盒基于双抗体夹心酶联免疫吸附原理，微孔板固相包被MYOG特异性捕获抗体，加入待测样本后，样本内肌细胞生成素抗原与固相抗体特异性结合，再加入酶标记MYOG检测抗体构建夹心复合物，经洗涤去除未结合游离组分后，底物在酶的催化下显色，显色强度与样本中MYOG含量成正比，通过吸光度检测与标准曲线拟合，可定量测定人样本中MYOG的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：0.18ng/mL

检测范围：0.375ng/mL~12ng/mL

反应时间：37℃样本孵育 85min；二抗孵育 45min；显色 20min

保存条件：试剂盒 2~8℃；浓缩标本稀释液若浑浊需丢弃更换

显色系统：双组份 TMB 显色液

检测波长：450nm+620nm 校正波长

标准曲线绘制：以标准品稀释浓度为横坐标，校正后 OD 值纵坐标绘制标准曲线

注意事项：微孔板加样顺序统一，避免加样时间差过大导致孔间误差
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

样本制备：肌肉组织裂解离心取上清，细胞上清样本过滤去除杂质，稀释后涡旋混匀。

酶标板上样：MYOG 预包被板分孔加样，标准品、待测样本、空白孔每孔加液 100μL。

一步法添加酶标二抗：直接加注 HRP 标记抗体工作液 50μL，混匀封板。

孵育反应：37℃避光孵育 70min。

洗板操作：洗涤缓冲液洗板 6 次，每次浸泡 30s，倒置拍干。

底物显色：加入显色液避光孵育 16min。

终止上机：终止液终止显色，酶标仪读数，绘制标准曲线计算 MYOG 浓度。