本试剂盒运用双抗体夹心酶联免疫吸附检测原理,微孔板固相固定人降解加速因子特异性捕获抗体,待测样本中的DAF抗原与固相抗体特异性结合;经孵育、洗涤去除非特异性结合物后,加入辣根过氧化物酶标记的DAF检测抗体,形成稳定的免疫复合物;随后进行底物显色、终止反应,检测各孔吸光度,吸光度数值随样本中DAF含量升高而增大,依据标准曲线即可定量测定样本中人降解加速因子的浓度。
产品参数:
产品名称 | 人降解加速因子(DAF)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E2961 |
英文名称 | DAF ELISA Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低可测 4.5pg/mL
检测范围:9~576pg/mL
反应时间:加样孵育 95min,酶标记抗体 55min,避光显色 13min
保存条件:试剂盒 2~8℃密封保存,开封后各组分 1 个月内使用完毕
显色系统:A、B 双试剂混合后显色
检测波长:450nm,620nm 做空白参比
标准曲线绘制:二次多项式拟合标曲,梯度稀释标准品测定后生成计算公式
注意事项:样本避免高温放置;洗板步骤每孔洗涤不少于 5 次;底物液出现蓝色即失效禁止使用
储存与有效期:
未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
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实验操作流程:
整套试剂室温放置 33min,取用酶标板,划分标准孔、样本孔、空白孔,每孔上样稀释样本 100μL,空白孔加稀释缓冲液。
直接向各孔加入酶偶联抗体液 55μL,摇匀后封板膜密封。
37℃恒温孵育 70min,全程避光操作。
撕膜弃液,洗板液浸润每孔 30s 后拍干,重复洗板 5 次。
每孔加显色底物 A、B 各 50μL,避光 37℃显色 18min。
加入终止液 50μL 混匀,强制终止反应。
450nm 波长测定 OD 值,空白调零,换算样本 DAF 浓度。
关键字: 人降解加速因子;DAF;ELISA试剂盒;
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