人结缔组织活化肽Ⅲ(CTAPⅢ)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，微孔板预先包被人结缔组织活化肽Ⅲ特异性捕获抗体，待测样本中的CTAPⅢ可与固相抗体发生特异性免疫结合；孵育完成后洗涤纯化体系，加入酶标记CTAPⅢ检测抗体，形成稳定的夹心免疫复合物；经底物显色、终止反应后检测吸光度，吸光度数值随样本中CTAPⅢ含量升高而增加，依据标准曲线可精准定量样本中该活化肽的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低可测 6.3pg/mL

检测范围：12.5~800pg/mL

反应时间：抗原抗体结合 75min，酶标记物 42min，避光显色 14min

保存条件：整套试剂 2~8℃，冻干标准品溶解后一次性使用不可留存

显色系统：双组分混合显色，硫酸终止由蓝变黄

检测波长：450nm，640nm 扣除背景

标准曲线绘制：二次拟合标准曲线，梯度标品录入软件生成定量公式

注意事项：血浆样本需添加抗凝剂；孵育过程保持湿度避免孔内液体蒸发；枪头一孔一换
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

公司正在出售的产品：

实验操作流程：

试剂盒室温放置 34min，取用固相酶标板，划分标准孔、样本孔、空白对照孔，每孔加入预处理稀释样本 100μL，空白孔加稀释液。

直接向各孔加入酶偶联工作液 55μL，摇匀后封板膜严实密封。

37℃恒温孵育 69min，酶标板平稳放置不晃动。

撕膜弃净孔内液体，洗板液加满静置 30s，拍干，重复洗板 5 次。

依次添加显色底物 A、B 各 50μL，避光 37℃显色 19min。

每孔加入终止液 50μL，轻晃混匀终止酶促反应。

450nm 波长测定吸光度，空白调零，根据标准曲线计算 CTAPⅢ 含量。