本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理,微孔板包被人RIG-1样受体(RLR)特异性抗体,加入待测样本与梯度标准品,样本中的RLR抗原与固相抗体特异性结合,洗涤纯化反应体系后加入酶标记二抗,形成特异性免疫夹心复合物,底物显色终止后检测吸光度,吸光度值与样本中RLR蛋白含量成正比,可实现样本靶标的定量检测。
基本参数:

产品名称:人视黄酸诱导基因/RIG-1样受体(RLR)ELISA试剂盒
英文名称:RLR-9 ELISA Kit
货号:Y-E2972
规格:48T/96T
灵敏度:检出限 4.8pg/mL
检测范围:28pg/mL ~ 1450pg/mL
反应时间:37℃孵育 88min,酶结合物 57min,底物显色 23min,合计 2h48min
保存条件:试剂盒 2~8℃避光存放,底物液单独避光包装,开封后尽快使用
显色系统:A+B 液混合显色,酸性终止液终止反应
检测波长:450nm+630nm 双波长读数
标准曲线绘制:五参数非线性拟合,8 个标准稀释梯度
注意事项:病毒感染样本易出现高值,超量程样本用样本稀释液梯度稀释;洗板浸泡时间每孔≥25s
试剂盒组成:

预包被抗体/抗原微孔板 96孔/48孔 固定捕获抗体/抗原,结合目标物
标准品 6支/套 制备标准曲线,定量检测依据
生物素标记抗体/抗原 1瓶 识别并结合目标物,提供酶结合位点
辣根过氧化物酶(HRP)标记亲和素 1瓶 与生物素结合,催化底物显色
底物溶液A、B 各1瓶 混合后作为酶促反应底物,产生颜色变化
终止液 1瓶 终止酶促反应,稳定显色结果
浓缩洗涤液 1瓶 清洗微孔板,去除未结合物质
封板膜 2张 孵育过程中防止污染和挥发
实验步骤如下:

全部试剂室温放置 31min,稀释浓缩洗涤液,梯度配制 RLR 标准品,标记酶标板孔位类型。
标准品孔加入 50μL 梯度标准液;待测孔加 45μL 稀释液 + 15μL 待测样本;空白孔无加样。
除空白孔外每孔加入酶标记抗体 100μL,封板密封,37℃孵育 67min。
弃净孔内液体,洗涤液浸泡每孔 37s,甩干,循环洗板 5 次,吸水纸拍干。
每孔加入显色双液各 50μL,轻微震荡,37℃避光显色 18min。
加入 50μL 终止液混匀终止酶促反应。
450nm 检测 OD 值,建立标准曲线定量 RLR 浓度。
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