人尿苷二磷酸葡萄糖神经酰胺葡萄糖基转移酶(UGCG)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测技术，固相酶标板固定UGCG特异性捕获抗体，待测样本中的靶标酶蛋白与固相抗体特异性免疫结合，加入酶标记检测抗体形成完整夹心复合物，经洗涤纯化后酶促底物显色，显色强度与样本中UGCG含量正相关，通过标准曲线换算实现定量检测。
产品参数：

‌灵敏度：0.81 ng/mL

检测范围：6ng/mL～310ng/mL

反应时间：37℃孵育 99min，二抗 40min，显色 18min，总 157min

保存条件：2～8℃冷藏，酶蛋白标准品禁止反复冻融超 3 次

显色系统：TMB 双组份混合显色

检测波长：450nm，参比 620nm

标准曲线绘制：6 梯度标准品，非线性拟合生成曲线

注意事项：裂解样本中去污剂浓度不可高于 0.1%，避免破坏抗原位点
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

准备稀释液：浓缩洗涤液稀释备用，梯度稀释 UGCG 标准品，细胞样本裂解后离心取上清稀释。

加样上板：酶标板对应微孔加入标准品、待测样本、空白试剂 100μL。

一步共孵加酶抗：每孔添加 HRP 标记 UGCG 检测抗体 100μL，封板封口。

恒温孵育：37℃避光孵育 65min。

洗板流程：倒掉废液，洗液浸泡 25s 拍干，重复洗板 5 次。

显色反应：加入显色 A、B 液各 50μL，暗处显色 15min。

终止读数：终止液终止酶反应，450nm 测 OD 值，绘制曲线计算 UGCG 浓度。