本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附技术,微孔板预先包被抗人sLOX-1特异性抗体,待测样本中的可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)抗原与固相抗体结合,洗涤后加入酶标记配对抗体形成夹心复合物,显色后检测吸光度,定量检测样本中sLOX-1浓度。
产品参数:
产品名称 | 人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1(sLOX-1)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E763 |
英文名称 | sLOX-1 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出限 0.22 ng/mL
检测范围:0.1 ng/mL ~ 6.4 ng/mL
反应时间:室温孵育 82min,二抗 48min,显色 19min
保存条件:2~8℃冷藏,板条拆分后装入自封袋加干燥剂
显色系统:单液 TMB 显色体系
检测波长:450nm
标准曲线绘制:软件导入标准品 OD 值自动生成标准曲线换算结果
注意事项:操作全程尽量避光,尤其显色步骤光照会加速底物失效
实验前准备工作:
1. 试剂平衡与稀释
试剂盒所有组分(酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液)从 2~8℃取出,室温(20~25℃)放置平衡 30min,严禁直接低温操作。
浓缩洗涤液配制:按标签标注比例用去离子纯水稀释(常见 20× 浓缩液:1 份浓缩液 + 19 份纯水),混匀备用,现配现用。
标准品复溶 / 梯度稀释:
冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解,室温静置 10min,轻柔吹打混匀;
按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品,单独标记,剩余原液分装 - 20℃避光保存,避免反复冻融。
待测样本预处理:血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释,浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清;溶血、脂血严重样本弃用。
2. 耗材与设备准备
设备:恒温 37℃孵育箱、酶标仪(450nm 主波长,630nm 参比)、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机(或手动洗板槽)、封板膜、离心管。
耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染,移液枪提前校准。
取出本次实验所需酶标板条,剩余未使用板条装入铝箔密封袋,加干燥剂 2~8℃避光保存。
3. 孔位规划标记
酶标板做好分区标记:空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔(所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差)。
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实验操作流程:
试剂盒室温放置 36min,取出酶标板,规划全部实验分组孔位。
各孔加入对应标准品或样本 50μL,紧接着加入酶标记试剂 50μL,封板覆膜。
水平震荡混匀,37℃孵育 69min。
弃废液,洗涤液浸泡 39s,吸水纸拍干,洗板 6 次。
显色底物 A、B 每孔 50μL,避光显色 19min。
终止液 50μL 加入终止酶促反应。
450nm 波长测值,标准曲线定量 sLOX-1。
关键字: 人可溶性凝集素样氧化低密度脂蛋白受体1;sLOX-1;ELISA试剂盒;
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