人清道夫受体B(SRB/CD36)ELISA试剂盒

本试剂盒采用双抗体夹心ELISA检测原理，酶标板微孔固定抗人清道夫受体B(CD36)特异性抗体。待测样本中的SRB/CD36抗原与固相抗体特异性结合，孵育洗涤后加入HRP标记检测抗体，形成完整的夹心免疫复合物，经底物酶促显色、终止反应后检测吸光度，依据标准曲线换算出样本中清道夫受体B的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：最低检出 0.082ng/mL

检测范围：0.26ng/mL～16.64ng/mL

反应时间：样本孵育 57min，二抗反应 45min，显色 15.5min

保存条件：2～8℃竖直冷藏，洗涤液浓缩液出现结晶 37℃水浴融化即可

显色系统：临用配制双组份 TMB 显色液

检测波长：450nm+650nm 双波长校正

标准曲线绘制：五点标准梯度，四参数非线性拟合

注意事项：高脂血清需稀释后检测，脂蛋白会竞争性结合抗体降低显色信号
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

试剂室温放置 30min，稀释浓缩洗涤缓冲液；取出包被板条划分孔位类型。

梯度 SRB/CD36 标准品 50μL 加入标准品孔，稀释待测样本 50μL 加入样本孔，空白孔留空。

各检测孔加入一步法酶标记一抗工作液 100μL，封板膜严实封口。

37℃避光孵育 60min，避免强光照射酶标板。

洗板 5 次，每次洗涤液浸泡 30s，甩出液体后反复拍干板条。

每孔添加显色 A 液、B 液各 50μL，避光 37℃显色 15min。

终止液终止显色反应，450nm 测 OD 值，根据标准曲线计算 SRB/CD36 含量。