人腮腺炎病毒IgM ELISA试剂盒

本试剂盒采用间接法酶联免疫吸附检测原理，酶标板微孔固定纯化的腮腺炎病毒抗原。检测时，样本中的腮腺炎病毒IgM抗体与固相抗原特异性结合，孵育洗涤后加入酶标记抗人IgM抗体，充分反应后洗涤，加入底物显色并终止反应，通过检测吸光度数值，结合标准曲线定量检测样本中腮腺炎病毒IgM抗体的浓度。
产品参数：

‌灵敏度：检出限 0.05AU/mL

检测范围：0.14AU/mL～8.96AU/mL

反应时间：抗原包被板孵育 47min，酶标二抗 44min，显色 13.8min

保存条件：2～8℃避光储存，病毒抗原包被板不可长时间暴露于室温

显色系统：单组份 TMB 稳定显色液

检测波长：450nm 单波长测定

标准曲线绘制：半定量四参数拟合曲线判定阴阳性及滴度

注意事项：发病 7 天内 IgM 浓度偏低，阴性结果需结合病程复查
通用注意事项：

样本要求

血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸；组织匀浆充分离心去除沉淀；样本分装冻存，反复冻融≥3 次会导致抗原降解，检测值偏低。

温度控制

孵育温度严格 37℃，温箱温度波动、室温过低会降低结合效率，背景升高、重复性变差。

避光操作

TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化，显色全程避光，试剂避光存放。

洗板规范

洗涤不充分会造成高背景、假阳性；拍干时使用干净吸水纸，禁止交叉污染微孔。

污染防控

实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶；枪头一次性更换，标准品与样本避免交叉加样；底物液变色、出现沉淀不可使用。

安全防护

终止液含稀硫酸，具有腐蚀性，避免接触皮肤、黏膜；实验废液集中收集中和后处理，不可直接倾倒。

失效判定

试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异，均判定失效，禁止继续实验。

稀释校正

样本 OD 值高于最高标准孔时，必须稀释重测，最终结果乘以稀释倍数；低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。

空白对照

空白孔吸光度应极低，若空白孔 OD＞0.1，说明洗涤不充分或试剂污染，实验作废重做。

储存禁忌

试剂盒不可冷冻结冰，冷冻会造成酶标抗体蛋白变性，直接导致试剂盒完全失效。

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实验操作流程：

试剂室温放置 25min，稀释浓缩洗涤液；组装酶标板并划分孔位组别。

梯度腮腺炎 IgM 标准品 50μL 加入标准孔，待测血清样本 50μL 加入样本孔，空白孔空置。

所有加样孔加入一步法酶标二抗工作液 100μL，封板后轻晃混匀体系。

37℃恒温避光孵育 58min，适配病原体抗体快速检测流程。

弃去孔内液体，洗涤液洗板 5 次，每次浸泡 32s，反复拍干板条。

每孔加入显色底物 A、B 各 50μL，37℃避光显色 13min。

终止液 50μL 终止显色，450nm 测吸光度，测定腮腺炎病毒 IgM 抗体水平。