本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,微孔板固相包被有人神经髓鞘蛋白(p2)特异性单克隆抗体,检测时加入标准品与待测样本,样本内的p2抗原与固相抗体特异性免疫结合,洗涤去除游离杂质后,加入辣根过氧化物酶标记的p2检测抗体,形成特异性免疫复合物,经再次洗涤后加入显色底物,酶促反应产生显色信号,终止反应后通过酶标仪检测吸光度,信号强度与样本中p2蛋白含量成正比,结合标准品梯度浓度绘制的标准曲线,可定量检测样本中人p2的表达浓度。
产品参数:
产品名称 | 人神经髓鞘蛋白(p2)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E198 |
英文名称 | p2 Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:检出下限 1.5ng/L
检测范围:8ng/L ~ 1120ng/L
反应时间:一抗孵育 70min,酶标二抗 45min,底物避光显色 22min,全程 2h17min
保存条件:整套试剂盒 2~8℃冷藏,底物液需单独避光存放;剩余包被板密封加干燥剂室温短放不可超 3 天
显色系统:双组份 A+B TMB 显色体系,2M H₂SO₄终止液终止
检测波长:450nm 单波长读数,无需参比校正
标准曲线绘制:线性回归拟合标准曲线,6 个标准梯度点,空白孔直接归零处理
注意事项:脑脊液样本需低速离心去除髓鞘碎片杂质;操作全程防止包被板孔壁刮擦破坏固相抗体
关键注意事项:
实验前需仔细阅读对应试剂盒的说明书,不同试剂盒的孵育时间、加样量可能存在差异
所有试剂需按要求储存,未用完的试剂需密封后放回规定温度(通常2-8℃或-20℃)
避免试剂污染,不同组分的移液器枪头需分开使用
洗板时需确保每孔都被洗涤液覆盖,防止出现假阳性结果
显色过程需避光,避免阳光直射影响结果
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实验操作流程:
试剂盒全部组分室温放置 25min 复温,浓缩洗涤液按比例用纯水稀释备用,梯度配制 p2 系列标准品,标记微孔板孔位分类。
标准品孔添加不同浓度 p2 标准品 50μL;样本孔先滴加 50μL 样本稀释液,再加入 10μL 待测血清 / 组织上清样本;空白孔空置不加样。
全部非空白孔加入辣根过氧化物酶标记 p2 特异性抗体 100μL,覆膜封紧板孔,37℃水浴避光孵育 55min。
掀开封板膜,倾倒孔内废液,每孔注满洗涤液浸泡 40s 后扣干,循环洗板 4 次,在吸水纸上充分拍净板内残液。
每孔分别添加显色底物 A 液、B 液各 50μL,低速震荡混匀微孔板,37℃暗环境反应 12min。
每孔加入终止液 50μL,摇晃微孔板混匀终止反应,终止后 15min 内完成读数。
酶标仪设定 450nm 检测吸光度,依托标准曲线拟合方程,换算待测样本内神经髓鞘蛋白 p2 浓度。
关键字: 人神经髓鞘蛋白;p2;ELISA试剂盒;
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