本试剂盒采用特异性抗原抗体夹心ELISA检测原理，酶标板预先包被人HAase特异性抗体，待测样本中的透明质酸酶与固相抗体特异性结合，孵育结束后洗除未结合的杂物质，加入酶标记二抗形成稳定免疫复合物，经二次洗涤纯化体系，加入底物显色，显色强度与样本中HAase含量成正比，通过吸光度检测与标准曲线比对，完成透明质酸酶的定量分析。
基本参数：
产品名称：人透明质酸酶(HAase)ELISA试剂盒
英文名称：HAase Elisa Kit
货号：Y-E995
规格：48T/96T
灵敏度：最低检出 0.09U/mL
检测范围：0.2～35U/mL
反应时间：室温孵育样本 90min，二抗 58min，显色 18min
保存条件：试剂盒 2～8℃，稀释后的标准品当日用完丢弃
显色系统：双组份显色基质混合使用
检测波长：450nm+600nm 双波长校正
标准曲线绘制：剔除极值后非线性拟合标准曲线
注意事项：操作温度稳定在 20～25℃，温度波动影响酶促显色速率
关键注意事项：
本试剂盒仅科研体外检测，严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射，TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用，杜绝交叉污染；所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃，温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分，残液会造成非特异性结合，背景偏高。
终止后需快速读数，放置过久吸光度会漂移，结果失真。
终止液含稀硫酸，避免接触皮肤、眼睛，若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2～8℃冷链，严禁高温暴晒。
实验步骤如下：
试剂盒室温回温 35min，HAase 捕获抗体包被板去除孔内液体，洗板 1 次后拍干微孔。
规划孔位：空白、标准品、组织样本孔；标准品孔加入梯度 HAase 标准品 60μL，样本孔加入上清稀释液 60μL，空白孔添加稀释缓冲液。
每孔加入 HRP 标记二抗 60μL，封板密封，37℃湿盒孵育 72min。
去除封板膜，倾倒孔内废液，洗涤液浸泡每孔 40s 弃液，洗板 6 次，倒置用力拍干。
配制显色工作液每孔加 100μL，37℃避光显色 14min。
每孔加注终止液 50μL，混匀终止显色反应。
450nm 波长读数，拟合标准曲线计算透明质酸酶活性对应蛋白含量。
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