本试剂盒基于双抗体夹心ELISA检测原理,固相酶标板包被抗人DNase-Ⅰ特异性抗体,可特异性捕获样本中的脱氧核糖核酸酶Ⅰ,孵育结合后洗板去除游离杂质,加入辣根过氧化物酶标记二抗形成免疫夹心复合物,充分反应后洗去未结合抗体,加入显色底物发生酶促反应,终止显色后检测吸光度,依据标准曲线精准测定样本中DNase-Ⅰ的含量。
基本参数:

产品名称:人脱氧核糖核酸酶Ⅰ(DNase-Ⅰ)ELISA试剂盒
英文名称:DNase-Ⅰ Elisa Kit
货号:Y-E3053
规格:48T/96T
灵敏度:检出下限 0.08ng/mL
检测范围:0.16~13ng/mL
反应时间:37℃孵育 75min,二抗 46min,避光显色 14min
保存条件:所有试剂 2~8℃避光,底物液禁止长时间暴露光源
显色系统:即用型 TMB 显色试剂
检测波长:450nm 单波长检测
标准曲线绘制:7 个梯度浓度构建曲线,R² 阈值 0.994
注意事项:核酸污染环境会造成本底偏高,操作台提前擦拭除酶
关键注意事项:

本试剂盒仅科研体外检测,严禁临床诊断使用。
全程避免试剂、板条强光直射,TMB 见光易失效。
移液器吸头一次性使用,杜绝交叉污染;所有操作无酶、无热源。
孵育温度严格控制 37℃,温度偏低会降低 OD 值、灵敏度下降。
洗板必须充分,残液会造成非特异性结合,背景偏高。
终止后需快速读数,放置过久吸光度会漂移,结果失真。
终止液含稀硫酸,避免接触皮肤、眼睛,若不慎接触大量清水冲洗。
实验废弃物按生物安全废弃物规范处理。
不同批次试剂盒组分不可混用。
试剂盒运输全程 2~8℃冷链,严禁高温暴晒。
实验步骤如下:

试剂盒室温平衡 26min,DNase-Ⅰ 包被板弃孔内保存液,洗涤液洗板 2 遍,拍干微孔残留液体。
划分孔位:空白孔、梯度标准孔、细胞裂解样本孔;标准品孔加入 DNase-Ⅰ 标准品 55μL,样本孔加入稀释裂解液 55μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶标记检测抗体 55μL,封板,37℃孵育 63min。
弃液洗板,每孔加满洗涤液静置 30s 倒掉,重复洗板 5 次,充分拍干微孔。
依次加入显色 A 液、B 液各 50μL,遮光 37℃显色 17min。
滴加终止液 50μL,轻微晃动酶标板终止反应。
酶标仪 450nm 检测吸光度,对照标准曲线定量 DNase-Ⅰ 浓度。
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