本试剂盒基于经典双抗体夹心ELISA检测原理,酶标板预先包被人DBP特异性抗体,样本中的维生素D结合蛋白与固相抗体特异性免疫结合,孵育完成反应后洗除未结合物质,加入HRP标记二抗构建免疫复合物,再次洗板纯化体系后加入底物显色,终止显色后检测吸光度,结合标准曲线即可定量检测样本中DBP的浓度。
基本参数:

产品名称:人维生素D结合蛋白(DBP)ELISA试剂盒
英文名称:DBP Elisa Kit
货号:Y-E769
规格:48T/96T
灵敏度:最低检出 0.07μg/mL
检测范围:0.15~18μg/mL
反应时间:37℃静置孵育 78min,二抗 49min,避光显色 18min
保存条件:全部试剂 2~8℃,底物液不可长期开盖暴露空气
显色系统:双组份混合后显色反应
检测波长:仅 450nm 检测 OD 值
标准曲线绘制:7 个浓度梯度,剔除异常孔后拟合曲线
注意事项:脂血样本会干扰光吸收,建议稀释 2 倍后复测校准
储存与有效期:

未开封整套试剂盒:2~8℃避光冷藏,禁止冷冻;有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条:自封袋密封,内置干燥剂 2~8℃避光;1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物:避光 2~8℃,避免光照失效。
浓缩洗涤液:2~30℃常温保存,结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品:分装 - 20℃冻存,避免反复冻融,1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下:

试剂盒室温回温 27min,DBP 包被微孔板弃保护液,洗涤液洗板 2 遍,倒扣拍干微孔水分。
规划孔位:空白对照、系列标准品、血清样本孔;标准品孔加入梯度 DBP 标准品 50μL,样本孔加入稀释血清 50μL,空白孔补稀释液。
每孔加入酶标记抗体工作液 50μL,密封封板,37℃恒温孵育 62min。
倒掉废液,洗板液注满每孔静置 30s 丢弃,重复洗板 4 次,吸水纸拍干。
每孔加入显色底物混合液 100μL,避光 37℃显色 16min。
滴加终止液 50μL 混匀终止显色。
酶标仪 450nm 测 OD 值,定量检测 DBP 浓度。
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