本试剂盒采用间接ELISA检测原理,微孔板包被卵清蛋白特异性抗原,样本中的人卵清蛋白特异性IgG抗体与固相抗原特异性结合,洗板后加入酶标记抗人IgG抗体,催化底物显色,显色强度与OVA sIgG含量成正比,可定量检测样本中特异性抗体水平。
产品参数:
产品名称 | 人卵清蛋白特异性IgG(OVA sIgG)ELISA试剂盒 | 货号 | Y-E397 |
英文名称 | OVA sIgG Elisa Kit | 规格 | 48T/96T |
灵敏度:最低检出抗体浓度≤0.1AU/mL
检测范围:0.3AU/mL–100AU/mL
反应时间:室温避光反应 118min
保存条件:2~8℃冷藏,包被板防受潮脱落包被抗原
显色系统:TMB 双组分显色
检测波长:450/630nm
标准曲线绘制:校准品梯度稀释四参数拟合定量曲线
注意事项:鸡蛋过敏患者血清建议新鲜检测,长期存放抗体效价下降
通用注意事项:
样本要求
血清、血浆避免严重溶血、脂血、黄疸;组织匀浆充分离心去除沉淀;样本分装冻存,反复冻融≥3 次会导致抗原降解,检测值偏低。
温度控制
孵育温度严格 37℃,温箱温度波动、室温过低会降低结合效率,背景升高、重复性变差。
避光操作
TMB 底物、酶结合物、神经递质 / 维生素类靶标样本见光易氧化,显色全程避光,试剂避光存放。
洗板规范
洗涤不充分会造成高背景、假阳性;拍干时使用干净吸水纸,禁止交叉污染微孔。
污染防控
实验耗材无 DNase、RNase、蛋白酶;枪头一次性更换,标准品与样本避免交叉加样;底物液变色、出现沉淀不可使用。
安全防护
终止液含稀硫酸,具有腐蚀性,避免接触皮肤、黏膜;实验废液集中收集中和后处理,不可直接倾倒。
失效判定
试剂盒超出有效期、试剂浑浊变色、标准品梯度无明显颜色差异,均判定失效,禁止继续实验。
稀释校正
样本 OD 值高于最高标准孔时,必须稀释重测,最终结果乘以稀释倍数;低于最低检测限标注 “低于试剂盒灵敏度”。
空白对照
空白孔吸光度应极低,若空白孔 OD>0.1,说明洗涤不充分或试剂污染,实验作废重做。
储存禁忌
试剂盒不可冷冻结冰,冷冻会造成酶标抗体蛋白变性,直接导致试剂盒完全失效。
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实验操作流程:
样本稀释:血清样本 1:10 稀释,充分颠倒混匀;
微孔加样:酶标板加入阴阳性对照、待测稀释血清 100μL;
一步免疫孵育:直接加入酶标记二抗,封板 37℃孵育 69min;
洗板流程:弃液后洗涤液浸泡 32s,拍干,洗板 5 次;
显色孵育:避光加入显色液 15min;
终止混匀:滴加终止液轻摇酶标板;
结果判定:酶标仪读数判定 OVA 特异性 IgG 抗体水平。
关键字: 人卵清蛋白特异性IgG;OVA sIgG;ELISA试剂盒;
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