本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附原理，固相酶标板包被人SEP1特异性抗体，样本中的硒蛋白1与固相抗体特异性结合，孵育反应后洗除未结合杂蛋白，加入辣根过氧化物酶标记二抗形成免疫夹心复合物，充分洗板后加入底物显色，显色强度与SEP1含量成正比，通过吸光度检测与标准曲线分析完成定量检测。
基本参数：
产品名称：人硒蛋白1(SEP1)ELISA试剂盒
英文名称：1-Sep Elisa Kit
货号：Y-E770
规格：48T/96T
灵敏度：≤0.07ng/mL
检测范围：0.14～11.6ng/mL
反应时间：封闭 28min，样本孵育 79min，二抗 48min，显色 17min
保存条件：试剂盒 2～8℃冷藏，拆分板条剩余部分密封防潮避光
显色系统：即用型单组分 TMB 显色液
检测波长：450nm+620nm 双波长扣除背景
标准曲线绘制：六组浓度梯度，四参数 Logistic 拟合生成曲线
注意事项：含硒抗凝管采集样本不可使用，会干扰蛋白抗原识别
储存与有效期：
未开封整套试剂盒：2～8℃避光冷藏，禁止冷冻；有效期 12 个月。
开封后保存
剩余酶标板条：自封袋密封，内置干燥剂 2～8℃避光；1 个月内用完。
HRP 酶结合物、TMB 底物：避光 2～8℃，避免光照失效。
浓缩洗涤液：2～30℃常温保存，结晶温水溶解不影响效果。
复溶后标准品：分装 - 20℃冻存，避免反复冻融，1 个月内使用。
过期试剂禁止使用。
实验步骤如下：
试剂盒室温静置 35min，SEP1 特异性包被微孔板去除保护液，洗涤缓冲液洗板 2 次，倒扣拍干微孔。
划分孔位：空白孔、梯度标准品孔、细胞上清样本孔；标准品孔加入 SEP1 标准品 50μL，样本孔加入稀释待测上清 50μL，空白孔加稀释缓冲液。
每孔加入 HRP 标记检测抗体 50μL，封板密封，37℃孵育 67min。
去除封板膜，倾倒废液，洗涤液浸泡每孔 30s 弃液，洗板 6 次，拍干微孔水分。
依次添加显色 A 液、B 液各 50μL，遮光 37℃显色 19min。
滴加终止液 50μL，轻摇板体终止酶促显色。
450nm 读取 OD 吸光度，标准曲线计算 SEP1 蛋白表达量。
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