人免疫反应性生长激素(irGH)ELISA试剂盒

本试剂盒以双抗体夹心ELISA法为核心检测原理，酶标板预包被人irGH特异性捕获抗体，孵育时样本中的免疫反应性生长激素与包被抗体特异性结合，再加入酶标记检测抗体形成固相免疫复合物，洗涤去除残留游离物质后，底物被酶催化产生有色产物，产物显色深浅与样本中irGH浓度成正比，通过酶标仪读数及标准曲线拟合，可准确检测样本中irGH的含量。
产品参数：

‌灵敏度：＜0.05 mIU/L

检测范围：0.1mIU/L～25mIU/L

反应时间：固相包被板预温后样本孵育 120min，二抗 60min，显色 15min，总 195min

保存条件：2～8℃避光，板条拆开后剩余板条放入铝箔袋密封冷藏

显色系统：TMB 显色体系，2mol/L H₂SO₄终止

检测波长：450nm/650nm 双波长校准读数

标准曲线绘制：6 个校准品梯度，四参数拟合，每批次实验必须同步做标准曲线

注意事项：血清样本需无溶血，溶血样本会干扰抗原抗体结合
实验前准备工作：

1. 试剂平衡与稀释

试剂盒所有组分（酶标板、标准品、酶结合物、底物、洗涤浓缩液、样本稀释液、终止液）从 2~8℃取出，室温（20~25℃）放置平衡 30min，严禁直接低温操作。

浓缩洗涤液配制：按标签标注比例用去离子纯水稀释（常见 20× 浓缩液：1 份浓缩液 + 19 份纯水），混匀备用，现配现用。

标准品复溶 / 梯度稀释：

冻干标准品加入配套标准品稀释液充分溶解，室温静置 10min，轻柔吹打混匀；

按说明书梯度倍比稀释出 5~7 个浓度梯度标准品，单独标记，剩余原液分装 - 20℃避光保存，避免反复冻融。

待测样本预处理：血清 / 血浆、组织匀浆、细胞上清用样本稀释液适当稀释，浑浊样本 12000r/min 离心 10min 取上清；溶血、脂血严重样本弃用。

2. 耗材与设备准备

设备：恒温 37℃孵育箱、酶标仪（450nm 主波长，630nm 参比）、多通道移液枪、吸水滤纸、洗板机（或手动洗板槽）、封板膜、离心管。

耗材无核酸酶、无热源、无蛋白污染，移液枪提前校准。

取出本次实验所需酶标板条，剩余未使用板条装入铝箔密封袋，加干燥剂 2~8℃避光保存。

3. 孔位规划标记

酶标板做好分区标记：空白孔、零标准孔、梯度标准品孔、待测样本孔、复孔（所有样本、标准品建议设置双复孔降低误差）。

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实验操作流程：

样本处理：血清样本常温融化，离心去除沉淀，按说明书倍数稀释；配制 irGH 系列标准品。

微孔板加样：标准孔、样本孔、对照孔分别加样 100μL，标记板条编号防止混淆。

酶结合物共加：每孔直接加入辣根过氧化物酶标记抗 irGH 抗体 100μL，密封酶标板。

温育反应：37℃避光孵育 65min，期间不可开盖。

洗板步骤：弃去孔内液体，加满洗涤液静置 30s，拍干，连续洗涤 5 次。

TMB 显色：每孔加入显色 A、B 液各 50μL，避光显色 14min。

终止检测：终止液终止反应，450nm 测定吸光值，计算样本 irGH 含量。