本试剂盒基于实时荧光PCR检测技术,特异性针对牛巨细胞病毒核酸序列设计特异性引物与探针,可精准检测牛血液、组织、呼吸道分泌物等各类临床样本中的病毒核酸。试剂盒配套优化的PCR反应体系,具备灵敏度高、特异性强、抗干扰能力优异的特点,可有效区分牛巨细胞病毒与其他牛源疱疹病毒,杜绝交叉反应。适用于牛群隐性感染、潜伏感染及急性感染的快速筛查,可为牛群病毒性疫病防控、流行病学调查及养殖检疫提供精准的实验数据支撑。
产品名称 | 同牛疱疹病毒型牛巨细胞病毒PCR检测试剂盒 | 货号 | YS-P013929 |
英文名称 | Bovine Cytomegalovirus(BCV,3)PCR | 规格 | 50T |
有效期 | 12个月 | 保存 | -20℃保存 |
基础原理:
采用特异性 Taqman 荧光探针结合病毒保守基因序列,样本核酸经高温变性、低温退火延伸扩增靶标片段,扩增过程探针水解释放荧光信号,依靠荧光强度定性判定样本含牛巨细胞病毒。
提取病牛血液、鼻拭子中总 DNA,引物特异性锁定牛巨细胞病毒衣壳蛋白编码基因,普通 PCR 扩增目的条带,琼脂糖凝胶电泳观察特异性条带完成病原检出。
一步法反转录荧光 PCR 体系,裂解液同步完成病毒核酸释放与蛋白灭活,针对病毒 DNA 聚合酶基因扩增,通过 Ct 值区分阳性感染样本与阴性健康样本。
操作步骤:
DNA提取(样本制备区)
使用自选方法或兼容的核酸提取试剂盒纯化样本DNA,确保无抑制剂残留。
标准曲线制备(样本制备区)
标记6支离心管为7至2号,每管加入45 μL DEPC-H2O(需使用带滤芯枪头)。
梯度稀释阳性对照:
7号管:加入5 μL 1×10^8拷贝/μL阳性对照,震荡混匀,得1×10^7拷贝/μL标准品;
依次稀释至2号管,最终浓度跨5个数量级(1×10^7至1×10^3拷贝/μL)。
所有标准品置于冰上备用,避免反复冻融。
试剂配制(试剂准备区)
反应液避光解冻后涡旋混匀,短暂离心分装至PCR管。
每反应体系20 μL,含预混引物、荧光染料及缓冲液。
加样(样本处理区)
分别加入5 μL待测DNA或标准品至反应管,阴性对照以DEPC-H2O替代。
盖紧管盖,避免气泡干扰。
PCR扩增(核酸扩增区)
按以下程序运行定量PCR仪:
预变性:95℃ 2分钟;
循环阶段(40次):95℃ 15秒 → 60℃ 30秒(采集荧光信号);
熔解曲线分析(可选)。
注意事项:
试剂盒含生物源性质粒模板,操作全程佩戴手套、口罩,阳性模板仅在生物安全柜开盖;
所有一次性耗材、PCR 废液、电泳凝胶实验后 121℃高压灭菌再丢弃;
试剂避免反复冻融,单次融化冰上放置不超过 2 h,使用完毕立即放回 - 20℃;
移液器吸头一次性使用,禁止重复吸取,防止交叉污染;
试剂盒仅用于科研检测,严禁人临床体外诊断;
扩增产物区产物不可带回试剂、提取区,防止气溶胶大面积污染实验室;
若阴性对照持续出现杂带,全部更换全新试剂盒,实验室台面、移液器紫外过夜消毒。
公司正在出售的产品:
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