血清铁浓度测试盒

血清铁浓度测试盒

产品介绍：

血清铁是指血液中转铁蛋白所结合的铁，该指标常用于鉴别缺铁性与非缺铁性贫血。

测定原理：

亚硫酸钠还原血清Fe3+生成成Fe2+，Fe2+进一步与2, 2’- 联吡啶显色，在520nm处有吸收峰，测定该波长光吸收值即可计算血清铁含量。

自备仪器和用品：

离心机、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、冰醋酸、氯仿和蒸馏水。

检测原理：

样本预处理解离：血清内结合于转铁蛋白上的三价铁，在酸性解离剂作用下被释放，同时加入还原剂将 Fe³⁺还原为 Fe²⁺，消除转铁蛋白、蛋白质大分子对铁离子的包裹干扰。

显色络合反应：游离二价铁与比色底物（如亚铁嗪）发生特异性络合反应，生成稳定紫红色有色复合物，复合物颜色深浅与样本中二价铁含量成正比。

空白‑标准‑样本对照定量：设置空白管扣除试剂本底吸光值，使用已知浓度铁标准品绘制标准曲线，在特定波长（560‑590 nm）读取各样品吸光度。

浓度换算计算：依据标准曲线回归方程带入样本 OD 值，乘以样本稀释倍数，最终换算出血清中铁离子实际浓度。
公司正在出售的产品：

操作步骤：

标准曲线绘制：

取6支试管，分别加入0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL标准系列溶液，补加提取液至1mL。

每管加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，以标准品浓度为横坐标，吸光度为纵坐标绘制标准曲线。

样本检测：

取1mL待测样本（若样本活性过高，需用提取液稀释），加入2mL底物缓冲液，37℃水浴预热5分钟。

加入0.5mL显色剂，混匀后37℃水浴准确反应10分钟。

立即加入2mL终止液终止反应，于405nm波长下测定吸光度，根据标准曲线计算样本中β-GAL活性。

微量酶标仪法操作步骤

加样：在96孔板中设置空白孔、标准孔、样本孔，每孔加50μL对应溶液。

反应：每孔加入100μL底物缓冲液，37℃孵育30分钟。

终止：每孔加入50μL终止液。

读数：用酶标仪在405nm波长下测定吸光度，计算酶活性。